诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与Caco-2细胞的结合活性研究

发布时间：2017-09-20 14:27

  本文关键词：诺如病毒病毒样颗粒的表达及其与Caco-2细胞的结合活性研究

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【摘要】：目的在杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞中表达诺如病毒(Noroviruses,NoV)的衣壳蛋白VP1,并验证其与Caco-2细胞的结合活性。方法利用杆状病毒表达系统转染的昆虫SF-9细胞进行诺如病毒VP1蛋白表达,用蔗糖密度梯度超速离心方法纯化,采用Western blot鉴定表达产物,采用流式细胞术检测NoV病毒样颗粒(Virus-like particles,VLPs)与Caco-2细胞的结合活性。结果重组质粒转染细胞表达产物经蔗糖密度梯度超速离心后进行SDS-PAGE,在分子质量单位55~70ku之间有3条蛋白带,与预期重组蛋白NoV-VLPs大小相符;Western blot分析各蛋白组分均能被兔抗NoV多抗血清识别;流式细胞仪分析显示,加入重组蛋白NoV-VLPs后荧光信号较阴性对照组显著增强,表明表达的重组蛋白NoV-VLPs能够与Caco-2结合,且3个组分的结合能力不同(P0.05),以组分5与Caco-2细胞结合的能力最强(P0.05)。结论 NoV-VLPs表达成功,并证明NoV-VLPs具有与Caco-2细胞结合活性,为NoV疫苗的开发和防治药物的研制奠定了基础。
【作者单位】： 天津医科大学基础医学院微生物学教研室;
【关键词】： 诺如病毒 杆状病毒表达系统 病毒样颗粒 Caco-细胞
【基金】：教育部留学回国人员科研启动基金资助项目 天津市卫生局科技基金资助项目(No.2012KZ076)
【分类号】：R392
【正文快照】： 20世纪70年代以来超过20种微生物被认为是急性胃肠炎病原体,人类诺如病毒(Noroviruses,NoV)是其中主要病原体之一[1~3]。NoV是全球范围内95%以上成人病毒性胃肠炎和婴幼儿散发性胃肠炎常见病原体[4],发展中国家儿童因NoV感染年死亡数为20万人[5]。NoV亦是天津市秋冬季婴幼儿

【参考文献】

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3 魏葆s，

本文编号：888615