家蝇Ⅲ龄幼虫消化系统内源性β-葡萄糖苷酶的组织定位和表达差异研究

发布时间：2017-09-20 14:44

  本文关键词：家蝇Ⅲ龄幼虫消化系统内源性β-葡萄糖苷酶的组织定位和表达差异研究

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【摘要】：目的以家蝇Ⅲ龄幼虫为研究对象,探讨家蝇(Musca domestica)消化系统内源性β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG)的组织分布、表达差异和器官功能定位。方法用原位杂交鉴定家蝇β-葡萄糖苷酶mRNA的组织定位。免疫组织化学法鉴定纤维素酶的组织定位。分离家蝇Ⅲ龄幼虫消化系统组织,用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法测定β-葡萄糖苷酶的活性,实时荧光定量PCR法检测家蝇β-葡萄糖苷酶mRNA在消化系统各器官中的表达差异。结果原位杂交显示,中肠、前肠和唾液腺上皮细胞是家蝇β-葡萄糖苷酶mRNA表达的部位。免疫组织化学染色显示,唾液腺、前肠和中肠上皮细胞是家蝇幼虫产生和分泌纤维素酶的主要部位。DNS法测定结果显示,家蝇幼虫唾液腺、前肠、中肠和后肠的β-葡萄糖苷酶活性分别为(0.80±0.06)、(0.38±0.02)、(1.20±0.05)和(0.26±0.02)IU/mg,各部位间酶活性差异有统计意义(P0.05);中肠的酶活性较高,占总酶活性的(45.45±1.27)%,后肠的酶活性最低,为(9.85±0.88)%。实时荧光定量PCR显示,家蝇β-葡萄糖苷酶mRNA只在前肠、中肠和唾液腺中表达,中肠的表达量约为前肠的5倍,唾液腺的表达量约为前肠的3倍,3者表达量差异有统计学意义(P0.05),而后肠未见该基因的表达。结论家蝇Ⅲ龄幼虫前肠、中肠和唾液腺均能分泌内源性β-葡萄糖苷酶,唾液腺和中肠为主要分泌器官。
【作者单位】： 贵阳医学院基础医学院;
【关键词】： β-葡萄糖苷酶 消化系统 家蝇
【基金】：国家科技支撑计划项目(No.2011BAC06B12) 国家自然科学基金(No.30960343) 国家教育部博士点专项基金(No.2008-220) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类课题(No.20105215120001) 贵州省教育厅培育项目(No.2009-0137)~~
【分类号】：R384
【正文快照】： 植物纤维素是动物重要的非淀粉多糖营养成分,动物主要靠内源性和外源性纤维素酶消化利用。其中β-葡萄糖苷酶(β-glucosidase,BG,EC 3.2.1.21)是纤维素酶复合酶系的主要成分之一,能将纤维二糖、纤维寡糖等水解为葡萄糖,在昆虫消化纤维素的过程中发挥着关键作用[1,2]。为了深

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本文编号：888704