大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究

发布时间：2017-09-22 13:52

  本文关键词：大豆24 kDa油体蛋白基因与aFGF融合转化红花的研究

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【摘要】：目的:利用红花表达酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblast growth factor,aFGF),为利用植物生物反应器规模化生产aFGF奠定基础。方法:将人源aFGF基因改造为植物偏好性的aFGF基因序列,通过PCR搭桥技术克隆植物偏好的aFGF基因,利用酶切连接方法构建植物油体表达载体,通过冻融法转到根瘤农杆菌EHA105,利用农杆菌介导的方法转化到塔城红花中,对转化红花进行PCR,Southern杂交,RT-PCR分子检测。结果:扩增出植物偏好的aFGF基因的全长序列,并与大豆油体蛋白基因Doil基因融合,成功地插入到改造好的含有大豆油体蛋白启动子表达载体中,探索了进行红花遗传转化的最佳条件,成功获得单位点插入的3个独立转化红花植株,在转录水平都有大小一致的aFGF的表达。结论:该实验成功构建了含aFGF植物油体表达载体,并筛选出最佳的遗传转化条件,A为0.6,侵染时间为10 min,共培养3 d,获得了aFGF转录水平表达的转基因红花植株,这将红花油体蛋白本身的皮肤保护作用,与FGFs的创伤修复作用累加,快速开发出外用创伤药物奠定基础。
【作者单位】： 吉林农业大学农学院;长春师范大学生命科学学院;吉林农业大学生物反应器与药物开发教育部工程研究中心;
【关键词】： aFGF 油体蛋白 红花
【基金】：国家高技术研究发展计划(863)项目(SQ2010AA1000691008) 教育部科技创新工程重大项目培育基金项目(70S018) 吉林农业大学2012年校内基金项目
【分类号】：R346
【正文快照】： 酸性成纤维细胞生长因子(acidic fibroblastgrowth factor,aFGF)可促进表皮细胞的有丝分裂,从而促进表皮细胞的增殖,加速创面愈合[1-3]。它在多种疾病中表现出了神经保护作用,修复损伤的神经元[4-6]。目前对aFGF的表达,纯化研究主要集中在微生物表达系统中,利用植物生产aFGF

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本文编号：901197