柯萨奇病毒B5巢式RT-PCR检测方法的建立

发布时间：2017-09-22 14:45

  本文关键词：柯萨奇病毒B5巢式RT-PCR检测方法的建立

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【摘要】：目的:建立一种快速、灵敏、特异的柯萨奇病毒B5(CVB5)检测方法。方法:根据GenBank发表的CVB5河南分离株全基因组序列,在其VP1区设计并合成巢式RT-PCR引物,优化PCR反应条件,建立检测CVB5的巢式RT-PCR方法。将已测得TCID50的病毒标准株进行10倍梯度稀释后用上述方法检测,以评价该方法的灵敏性;将5株不同的CVB5毒株和EV71等4株其他肠道病毒毒株及阴性对照用该方法进行扩增,以检测其特异性。用建立的巢式RT-PCR方法对52份病毒性脑炎病例样本进行检测。结果:该方法对CVB5的两轮PCR扩增敏感性分别为10TCID50和10-4TCID50;所有CVB5毒株用该方法扩增结果均为阳性,所选其他肠道病毒扩增结果均为阴性。52份临床病例样本中检出10份CVB5阳性,阳性率为19.23%。结论:所建立的CVB5巢式RT-PCR检测方法具有良好的灵敏度和特异度。
【作者单位】： 郑州大学公共卫生学院流行病学教研室;郑州市疾病预防控制中心传染病防治科;河南省疾病预防控制中心传染病预防控制所;郑州市儿童医院感染性疾病科;
【关键词】： 柯萨奇病毒B 巢式RT-PCR 检测
【基金】：河南省医学科技攻关基金资助重大项目201001015 河南省医学科技攻关计划普通项目201102017 河南省医学科技攻关计划省部共建项目201201003
【分类号】：R373
【正文快照】： 近年来,河南省暴发多起病毒性脑炎,经检测主要由柯萨奇病毒B5(coxsackie virus B5,CVB5)引起[1]。CVB5是一种常见的能引起病毒性脑炎的肠道病毒,属于肠道病毒属小核糖核酸病毒,无包膜,单股正链RNA[2],其引起的病毒性脑炎在我国广泛存在[3-4]。病毒的分离培养与PCR扩增测序是

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本文编号：901415