RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α转录后调控机制的初步研究

发布时间：2017-09-24 04:09

  本文关键词：RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α转录后调控机制的初步研究

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【摘要】：目的:探讨RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α(IκB-α)转录后调控机制。方法:构建IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒,并转染3T3细胞;体外生物素标记IκB-αmRNA 3'UTR并进行RNA pull-down;过表达及干扰HuR后,qPCR检测其对IκB-αmRNA稳定性的影响,Western bltting检测其对IκB-α蛋白表达的影响。结果:(1)IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒构建成功;(2)报告基因检测:共转染pcDNA3-HA-HuR质粒及IκB-αmRNA 3'UTR报告基因质粒后与对照组相比其数值明显增高;(3)用生物素标记的IκB-αmRNA3'UTR探针进行RNA pull-down,可以检测到特异性结合的HuR蛋白;(4)过表达HuR,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显上调;干扰HuR表达后,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显下调。结论:(1)HuR可以与IκB-αmRNA 3'UTR特异性结合并参与调节IκB-αmRNA 3'UTR的功能;(2)HuR对IκB-αmRNA稳定性无明显影响,其主要调控IκB-α蛋白表达,使其表达上调。
【作者单位】： 新疆医科大学病理生理学教研室;南方医科大学病理生理学教研室;武警新疆总队医院普外科;武警新疆总队医院神经外科;宁波大学医学院组织学教研室;新疆医科大学机能中心;
【关键词】： HuR蛋白 NF-κB抑制因子α 转录后调控
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81171476) 浙江省杰出青年科学基金资助项目(No.R2101166) 宁波市创新团队项目(No.2011B82014)
【分类号】：R346
【正文快照】： RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)是近年来发现的具有多种生物学作用的分子家族,其中HuR属于胚胎致死异常视觉家族的RBPs,在体内表达广泛。最初发现HuR与神经分化相关,通过与靶mRNA 3'UTR的ARE结合,在转录后水平调控RNA的稳定性和蛋白表达。近年发现,HuR与细胞增殖、炎

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