四重PCR检测致病性嗜水气单胞菌

发布时间：2017-09-24 08:01

  本文关键词：四重PCR检测致病性嗜水气单胞菌

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【摘要】：目的建立一种能够快速准确地检测致病性嗜水气单胞菌的四重PCR方法。方法根据致病性嗜水气单胞菌的丝氨酸蛋白酶(ahpA)基因、气溶素(aerA)基因和溶血素(hlyA)基因的保守序列以及嗜水气单胞菌的16SrRNA基因种属特异性序列分别设计4对特异性引物,通过优化各引物浓度、退火温度和Mg2+浓度,确定了四重PCR的最佳反应条件;然后进行特异性和敏感性试验,并比较其与常规微生物学方法对不同菌株和临床样本的检出率。结果该方法特异性好,能特异性检测并鉴别出嗜水气单胞菌致病性菌株;检测灵敏度高,最低可检测到约100fg的嗜水气单胞菌基因组DNA;对9株嗜水气单胞菌的检测结果与常规微生物学方法一致,对56份送检的水产动物样品的检出率为21.4%,高于常规微生物学方法的16.1%,两者检测结果符合率为94.6%。结论成功建立了能同时检测嗜水气单胞菌16SrRNA、aerA、ahpA和hlyA基因的四重PCR方法,能快速、准确地对嗜水气单胞菌进行检测并区分致病性与非致病性菌株。
【作者单位】： 广西水产研究所;上海海洋大学水产与生命学院国家水生动物病原库;
【关键词】： 嗜水气单胞菌 S rRNA基因 ahpA基因 aerA基因 hlyA基因 四重PCR
【基金】：广西科技攻关项目(桂科攻1123006-5,1355010-3)资助~~
【分类号】：S852.6;R37
【正文快照】： 致病性嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)属于气单胞菌科(Aeromonadaceae)气单胞菌属(Aeromonas),是一种广泛存在于水环境中的病原菌,常引起我国淡水养殖鱼类的暴发性败血症,也能引起爬行类、两栖类、鸟类以及哺乳类等多种动物发病及感染人类引起腹泻、败血症等,属典型的人

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本文编号：910241