幽门螺杆菌CagA转运相关蛋白CagE、Cagδ及Cagβ的克隆表达及免疫反应性分析

发布时间：2017-09-25 20:35

  本文关键词：幽门螺杆菌CagA转运相关蛋白CagE、Cagδ及Cagβ的克隆表达及免疫反应性分析

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【摘要】：目的构建幽门螺杆菌IV型分泌系统组分中与CagA转运相关蛋白cagE(HP0544)、cagδ(HP0522)及cagβ(HP0524)编码基因重组质粒,在大肠埃希菌中表达并分析表达蛋白的免疫反应性。方法根据在线预测的3种蛋白信号肽及跨膜区特征,以标准菌株HP26695染色体DNA为模板扩增相关蛋白编码片段,与表达载体pET28a及pGEX4t-1连接后转入大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达,分析蛋白表达状态,用Western blot检测表达蛋白与HP26695全菌蛋白免疫血清的反应。结果测序及飞行质谱鉴定表明成功构建CagE、Cagδ及Cagβ的表达载体,其中Cagδ可大量可溶表达,CagE及Cagβ主要以包涵体形式表达。Westernblot显示3种表达蛋白均能被HP26695全菌蛋白免疫血清识别,但Cagδ的免疫反应性较弱。结论成功获得HP26695的与CagA转运相关CagE、Cagδ及Cagβ重组蛋白,其中CagE和Cagβ具有较好的免疫反应性,是潜在的药物靶点和诊断生物标志物。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 传染病预防控制国家重点实验室;
【关键词】： 幽门螺杆菌 蛋白表达 抗原性
【基金】："十二五国家科技支撑计划"和"幽门螺杆菌感染诊治的多种因素一次性检验技术平台的研究"项目(No.2012BAI06B02)
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)是微需氧的革兰阴性菌,能引起严重的胃十二指肠疾病,如消化性溃疡、胃炎及胃癌等,WHO将其确定为Ⅰ类致癌因子,世界人口中约半数处于慢性感染状态[1]。从不同患者体内分离的Hp具有高度的遗传多样性,最显著的差异就是cag致病岛(CagPAI)的有无[2]

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