大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备及其对T细胞增殖的影响

发布时间：2017-09-26 10:11

  本文关键词：大鼠肠系膜淋巴结和外周淋巴结固有exosome的制备及其对T细胞增殖的影响

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【摘要】：目的从大鼠肠系膜淋巴结、外周淋巴结中分离纯化exosome,鉴定其对T细胞增殖的影响。方法取出BN(RT1n)大鼠的外周淋巴结及肠系膜淋巴结并研磨、离心以获得非细胞组织上清,采用超滤密度梯度离心法提取exosome。透射电镜对收集的exosome进行形态学鉴定,BCA法进行蛋白定量,SDS-PAGE电泳分离蛋白,Western blot检测IL-10的表达,并通过混合淋巴细胞培养检测其对T细胞增殖的影响。结果两种淋巴组织来源的非细胞组织上清均含有exosome,肠系膜淋巴结源性exosome蛋白浓度[(1.92±0.10)μg/μL]显著高于外周淋巴结源性exosome[(1.57±0.06)μg/μL,P0.05],SDS-PAGE显示两种组织源性exosome所含蛋白种类和数量有明显差异,Western blot显示肠系膜淋巴结固有exosome中IL-10的表达显著高于外周淋巴结固有exosome,混合淋巴细胞培养结果显示肠系膜淋巴结固有exosome和外周淋巴结固有exosome对T细胞的增殖均有促进作用(P0.05),外周淋巴结源性exosome的促增殖作用显著大于肠系膜淋巴结源性exosome(P0.05)。结论肠系膜淋巴结、外周淋巴结均含有组织固有exosome,两种组织来源exosome有蛋白浓度和蛋白种类的差异,且均能促进淋巴细胞增殖,促进程度有显著差异。
【作者单位】： 第三军医大学新桥医院泌尿外科;第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤烧伤与复合伤国家重点实验室;
【关键词】： exosome 淋巴结 超滤密度梯度离心 混合淋巴细胞培养
【基金】：国家自然科学基金(30872580)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 淋巴结是人体的重要免疫器官,起着过滤淋巴液和进行免疫应答的作用;其中,肠系膜淋巴结还参与了调节肠道对食物抗原和共生菌抗原无应答的免疫调节作用[1]。因此,不同部位的淋巴结因其独特的微环境而表现出不同的免疫功能和特点;与此同时,免疫器官也必须作为一个结构完整的整体

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本文编号：922902