P19细胞过表达外源Necdin对其细胞增殖的影响

发布时间：2017-09-27 02:06

  本文关键词：P19细胞过表达外源Necdin对其细胞增殖的影响

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【摘要】：构建PcDNA3.1/necdin真核表达载体并制备稳定过表达Necdin的P19细胞克隆,检测稳定过表达Necdin对P19细胞增殖的影响。从正常培养P19细胞提取RNA反转录成cDNA,以此作为PCR模板扩增得到necdin目的基因,插入PcDNA3.1载体的EcoRⅠ和XhoⅠ位点;脂质体法将构建的真核表达载体PcDNA3.1/necdin转染P19细胞,G418筛选后挑取细胞单克隆,Western印迹鉴定细胞单克隆中Necdin的表达水平。CCK-8法检测过表达necdin对P19细胞增殖的影响。成功构建PcDNA3.1/necdin真核表达载体并获得稳定高表达Necdin的P19细胞克隆,检测发现P19细胞过表达Necdin后其细胞增殖未发生明显变化。P19细胞稳定过表达外源Necdin对其细胞增殖无明显影响。
【作者单位】： 中南大学;军事医学科学院基础医学研究所;
【关键词】： Necdin 载体构建 细胞转染 P细胞 过表达 细胞增殖
【基金】：北京市自然科学基金项目(5112027)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： P19胚胎瘤细胞(P19 embryonal carcinoma cells,P19ECCs)[1]来源于C3H/He雄性小鼠的畸胎瘤,具有多向分化潜能及较强的再生能力。例如,在10-6MRA诱导下,向神经细胞方向分化,并分化为多种类型的神经元及神经胶质细胞[2],在此过程中,神经发生过程中相关基因的表达模式与正常小鼠

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本文编号：927003