形成拟胚体细胞数量对小鼠胚胎干细胞心肌细胞及内皮细胞分化的影响
本文关键词:形成拟胚体细胞数量对小鼠胚胎干细胞心肌细胞及内皮细胞分化的影响
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【摘要】:目的:探讨形成拟胚体(EBs)起始小鼠胚胎干细胞(ESCs)数量对心肌细胞及内皮细胞分化的影响。方法:将形成EBs起始ESCs数量为400,1 000,4 000的3个组(HD400,HD1000,HD4000)通过悬滴法促进其分化。免疫荧光检测TnT及CD31的表达;在不同时间点计算三个组搏动EBs百分比;RT-PCR检测Nkx2.5,GA-TA4,β-MHC,flk-1,CD31,tie-2基因表达水平。结果:通过悬滴法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT及CD31表达;HD1000组和HD4000组相比HD400组有更高的搏动EBs百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC基因表达水平;HD400组相比HD1000组和HD4000组有更高的flk-1,CD31,tie-2基因表达水平(P0.05)。结论:形成EBs起始ESCs数量是影响心肌细胞和内皮细胞分化的一个重要因素,起始细胞数量多则心肌细胞分化程度高,数量少则内皮细胞分化程度高。
【作者单位】: 武汉大学中南医院心内科;南方医科大学神经生物学教研室;
【关键词】: 胚胎干细胞 心肌细胞 内皮细胞 分化 悬滴法
【基金】:国家自然科学基金资助项目(编号:81200119) 中央高校基本科研业务费专项资金(编号:121007)
【分类号】:R329.1
【正文快照】: 胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)是一种高度未分化的细胞,在特定条件下,体外培养可分化成外胚层、中胚层和内胚层三个胚层的多种细胞,这其中包括中胚层的心肌细胞和内皮细胞。体外常用悬滴法形成拟胚体(embryoid bodies,EBs)促进ESCs向各个胚层细胞分化。既往研究使用
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