A549细胞炎症氧化应激模型Nox1启动子差异结合蛋白的筛选

发布时间：2017-09-29 09:20

  本文关键词：A549细胞炎症氧化应激模型Nox1启动子差异结合蛋白的筛选

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【摘要】：目的在炎症氧化应激细胞模型中筛选参与Nox1启动子活化的相关调控蛋白。方法 TNF-α刺激A549细胞建立炎症氧化应激细胞模型,运用DNApull-down技术筛选出Nox1启动子区结合蛋白,再用二维凝胶电泳技术分离pull-down后的结合蛋白,然后在2D凝胶上选取与对照组表达差异大于1.5倍的蛋白质点进行切胶,最后经基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,筛选出Nox1启动子区差异结合蛋白。结果 2D凝胶上共筛选出1.5倍以上差异蛋白点7个,均为表达上调蛋白,鉴定出GLE1、DDX19A,KRT1、KRT1O四种蛋白质。结论 GLE1、DDX19A,KRT1、KRT10参与了TNF-α诱导的A549细胞Nox1活化的基因调控,为研究炎症氧化应激细胞模型的Nox1启动子区调控蛋白的生物学功能奠定了实验基础。
【作者单位】： 南方医科大学研究生学院;广州军区广州总医院呼吸内科;南方医科大学病理生理学教研室;南方医科大学南方医院急诊科;
【关键词】： 肿瘤坏死因子-α Nox 氧化应激 转录调控 A细胞
【基金】：国家自然科学基金(81070003)~~
【分类号】：R363
【正文快照】： 肺泡n型上皮细胞作为肺泡L皮细胞的“干细胞”，，具有增殖和分泌的功能，在肺部炎症及氧化应激过程中起重要作用，促发“瀑布式炎症级联反应”’!。在肺部感染过程中可产生具有破坏病原微生物及第二信使功能的活性氧(ROs)而启动下游一系列炎症氧化应激反应，并可介导细胞凋亡

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本文编号：941233