不同来源胆盐水解酶基因在大肠杆菌中的表达

发布时间：2017-10-02 03:29

  本文关键词：不同来源胆盐水解酶基因在大肠杆菌中的表达

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【摘要】：根据GenBank上报道的两歧双歧杆菌ATCC 29521的胆盐水解酶基因(BSH)序列和嗜酸乳杆菌NCFM的胆盐水解酶基因(BSHA和BSHB)序列,设计引物通过PCR扩增获得BSH基因,将其连接到表达载体pET28a(+),构建pET-BSH表达质粒,经IPTG诱导表达后,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测表明在分子质量大小约40、43、45kD处有预期条带出现,初步表明蛋白表达成功。重组菌产生的胆盐水解酶水解甘氨胆酸钠产生的甘氨酸经茚三酮比色法分析,表明该重组的胆盐水解酶具有水解活性。
【作者单位】： 东北农业大学乳品科学教育部重点实验室;国家乳品工程技术研究中心;
【关键词】： 胆盐水解酶 克隆表达 活性测定
【基金】：国家自然科学基金项目(31171718) 国家“863”计划项目(2011AA100902) “十二五”国家科技支撑计划项目(2012BAK17B04) 黑龙江省教育厅科学技术研究重点项目(12511z005)
【分类号】：R378
【正文快照】： 血清胆固醇浓度过高是引起冠心病等心血管疾病的重要因素[1],人和动物体内的初级胆盐主要是由胆固醇在肝脏中合成,在碳24位置将甾核和一个甘氨酸或者牛磺酸通过酰胺键连接。结合胆盐存储在胆囊中,通过胆管分泌到小肠,这种结合胆盐本能的捕捉膳食胆固醇和脂肪,使它们通过肠上

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本文编号：957328