小鼠MSCs三种移植途径在急性肝损伤的活体成像示踪研究

发布时间：2017-10-11 01:15

  本文关键词：小鼠MSCs三种移植途径在急性肝损伤的活体成像示踪研究

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【摘要】：目的：通过小动物活体成像系统(in vivo imaging system, IVIS),对MSCs在急性肝损伤小鼠体内进行动态示踪,了解MSCs在小鼠体内迁移、分布和定植情况。 方法：1.复苏、传代绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein, GFP)-荧光素酶(Luciferase, Luc)双报告基团转染的MSCs;2.选取雄性C57BL/6小鼠,48只；3.建立四氯化碳急性肝损伤模型；4.小鼠随机分为四组：尾静脉组(8只),门静脉组(8只),肝组织内组(8只)和对照组(8只)；5.分别经尾静脉、门静脉、肝组织内移植MSCs;6.移植后6h、24h、72h、120h、168h,使用IVIS示踪各组小鼠体内和体外脏器MSCs的定植情况。 结果：1.复苏传代后的MSCs状态良好,MSCs发光效果稳定,荧光强度随细胞浓度的增加而增强；2.建立了均衡性与稳定性高的小鼠急性肝损伤模型；3. IVIS示踪显示：经尾静脉途径移植MSCs在小鼠尾部与肺脏有荧光素表达现象,但肝脏部位未见荧光素表达；经门静脉、肝组织内移植的小鼠肝脏均可见荧光素表达；5.经门静脉移植MSCs的生物发光的荧光素表达光子数量较肝组织内移植的高,但两者无统计学差异(P0.05)；6.MSCs三种途径移植在体内、体外脏器荧光素表达强度均随时间变化逐渐衰减。 结论：经门静脉、肝内组织移植的MSCs可在小鼠受损的肝脏定植。
【关键词】：骨髓间充质干细胞 急性肝损伤 移植途径 活体成像系统
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R657.3
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-8
• 目录8-11
• 英文缩略词表11-12
• 第零章 绪论12-15
• 0.1 骨髓间充质干细胞12
• 0.2 骨髓间充质干细胞与肝脏损伤修复12-13
• 0.3 骨髓间充质干细胞与移植途径13-14
• 0.4 体内生物发光成像技术14-15
• 第一章 小鼠骨髓间充质干细胞的复苏、传代15-21
• 1.1 背景15
• 1.2 实验材料15-16
• 1.2.1 主要实验试剂15
• 1.2.2 主要实验器材15-16
• 1.2.3 相关实验试剂配置16
• 1.3 实验方法16-18
• 1.3.1 细胞复苏16
• 1.3.2 细胞传代16-17
• 1.3.3 MSCs细胞悬液的配置及细胞转染发光强度的鉴定17-18
• 1.4 实验结果18-19
• 1.5 附图19-21
• 第二章 C57BL/6小鼠急性肝损伤模型的建立21-26
• 2.1 背景21
• 2.2 实验材料21-22
• 2.2.1 实验动物21
• 2.2.2 主要试剂及器材21
• 2.2.3 相关实验试剂配置21-22
• 2.3 实验方法22-24
• 2.3.1 实验动物分组及饲养22
• 2.3.2 急性肝损伤模型的建立22
• 2.3.3 小鼠肝脏组织石蜡切片HE染色分析22-24
• 2.3.4 统计学方法24
• 2.4 实验结果24-25
• 2.5 附图25-26
• 第三章 三种移植途径的技术操作部分26-31
• 3.1 背景26
• 3.2 实验材料26
• 3.2.1 实验动物准备26
• 3.2.2 主要试剂及器材26
• 3.2.3 细胞悬液的配置26
• 3.3 实验方法26-27
• 3.3.1 尾静脉移植标准化操作流程26-27
• 3.3.2 门静脉移植标准化操作流程27
• 3.3.3 肝组织内移植标准化操作流程27
• 3.4 实验结果27-29
• 3.5 附图29-31
• 第四章 三种移植途径的活体成像分析31-44
• 4.1 背景31
• 4.2 实验材料31-32
• 4.2.1 实验动物31
• 4.2.2 主要试剂及器材31
• 4.2.3 荧光素酶的配置31-32
• 4.3 实验方法32-33
• 4.3.1 细胞成像32
• 4.3.2 小鼠体内和体外脏器成像32
• 4.3.3 数据的获取32-33
• 4.3.4 统计学分析33
• 4.4 实验结果33-39
• 4.4.1 96孔板细胞成像结果33
• 4.4.2 小鼠体内活体成像结果33-34
• 4.4.3 脏器离体成像结果34-35
• 4.4.4 统计学结果35-39
• 4.5 附图39-44
• 第五章 讨论44-51
• 5.1 小鼠骨髓间充质干细胞的复苏、传代44-45
• 5.2 C57BL/6小鼠急性肝损伤模型的建立45-46
• 5.2.1 染毒途径的选择45-46
• 5.2.2 染毒剂量的选择46
• 5.2.3 染毒时间的选择46
• 5.3 小鼠活体成像分析46-51
• 5.3.1 关于MSCs移植的数量46-47
• 5.3.2 三种移植途径的活体成像评价47-51
• 第六章 结论51-52
• 参考文献52-56
• 攻读硕士学位期间的研究成果56-57
• 致谢57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：1009669