尼古丁对大鼠髌腱肌腱干细胞生物学特性影响的实验研究

发布时间：2017-11-26 16:25

  本文关键词：尼古丁对大鼠髌腱肌腱干细胞生物学特性影响的实验研究

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【摘要】：目的:探讨体外尼古丁对大鼠髌腱肌腱干细胞(tendon-derived stem cells,TDSCs)的细胞活力、细胞早期凋亡以及肌腱相关基因表达的影响,揭示吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合的潜在细胞学发病机制。方法:无菌条件下取8周龄SD大鼠的髌腱,I型胶原酶消化分离获得单个有核细胞,以最适密度(50个/cm2)进行接种,细胞呈克隆样生长,获得原代TDSCs。基础培养细胞至第3代,将其分为两组,实验组用不同浓度的尼古丁培养基(10-7 M,10-6 M,10-5 M,10-4 M和10-2 M)干预,对照组继续采用基础培养基(0M)培养。处理6 h、24 h、48 h和72 h后分别应用四唑盐(MTT)比色法检测尼古丁对TDSCs体外存活的影响,72h后应用Annexin V-FITC/PI双染法检测尼古丁对TDSCs体外早期凋亡的影响,实时荧光定量PCR(Realtime PCR)检测肌腱相关基因Col1a1和Scx的表达。结果:与对照组相比,实验组不同浓度的尼古丁干预下,TDSCs的细胞活力呈下降趋势,呈时间依赖性和浓度依赖性,浓度高于10-4 M时作用显著,差异具有统计学意义(P0.05)。流式细胞仪检测TDSCs早期凋亡(Annexin V+/PI-)的数量随着尼古丁浓度的增加而增加,差异具有统计学意义(P0.05)。同时,Realtime PCR检测结果显示:与对照组相比,实验组中Col1a1和Scx的m RNA表达水平均降低,浓度高于10-5 M时作用显著,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:体外尼古丁可抑制大鼠髌腱TDSCs的细胞活力,导致TDSCs早期凋亡,同时抑制TDSCs中成肌腱分化转录、细胞外基质合成相关基因的表达。这可能是吸烟导致肌腱病变以及损伤肌腱延迟愈合的潜在细胞学发病机制。
【作者单位】： 东南大学附属中大医院骨科;
【基金】：国家自然科学基金青年基金项目(81201422) 江苏省自然科学基金青年基金项目(BK2012334) 东南大学基本科研业务费“创新基金”项目(3290002401) 国家大学生创新训练计划(1210286090) 中国博士后基金资助(2012M520983) 江苏省“六大人才高峰”资助项目(2013-WSW-054)
【分类号】：R965
【正文快照】： 吸烟可导致骨质疏松[1]、骨折延迟愈合或不愈合[2]、骨骼肌肌力下降[3]等骨骼肌肉系统疾患。有研究报道,吸烟会导致肌腱病变和损伤肌腱的延迟愈合[4,5]。然而,其潜在的细胞学发病机制尚未阐明。肌腱组织中的肌腱干细胞在维持肌腱稳态与修复中发挥重要作用。吸烟是否对肌腱干细

【共引文献】

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1 朱玉德;胶质瘤干细胞的生物学特性及其与胶质瘤血管发生的关系[D];苏州大学;2013年

2 杜兆杰;牵张成骨中交感神经调控骨髓间充质干细胞动员与迁移的研究[D];第四军医大学;2013年

3 潘竹;细胞非对称分裂相关蛋白质LGN构象调控的结构和功能研究[D];复旦大学;2011年

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1 刘鹏;失交感神经支配对骨牵张中成骨趋化因子PDGF影响的研究[D];第四军医大学;2013年

2 周志斐;α7nAChR在尼古丁对人牙周膜干细胞成骨分化负性调控中的作用及其机制研究[D];第四军医大学;2013年

3 张志强;大鼠肝癌免疫微环境中Treg细胞与TGF-β1、IL-10水平的相关性分析[D];山西医科大学;2014年

4 吴丽云;大肠癌变过程中microRNA、DNA甲基转移酶的相互调控及中药干预[D];广州中医药大学;2014年

5 卢俊杰;肩袖撕裂疾病发生的危险因素Meta分析[D];泸州医学院;2014年

6 米尔萨力江·亚森;兔椎间盘细胞增殖及干细胞标志物随增龄过程的变化[D];复旦大学;2012年

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1 陶建军;柯玉宽;彭明铭;陈永明;黄明;黄晓勇;施俊;;手部肌腱自发断裂修复23例[J];郧阳医学院学报;2009年04期

2 周游;唐康来;;肌腱病模型研究进展[J];中国运动医学杂志;2013年09期

3 杨建军;蒋佳;陈世益;;生物力学在肌腱愈合中作用的研究进展[J];中国骨与关节损伤杂志;2012年12期

4 叶金朝;喹诺酮类引起肌腱病变[J];国外医药(抗生素分册);1996年03期

5 崔清波,李昭铸,韩福友;前列腺素E_2局部注射建立肌腱病动物模型及与凋亡关系的实验研究[J];创伤外科杂志;2005年06期

6 V.Khoury;鋭.Cardinal;朱玉兆;;“肌腱软化(Tenomalacia)”:肌腱病变的一种新的超声征象?[J];国际医学放射学杂志;2009年02期

7 姬树青;马信龙;马剑雄;朱少文;;短期激素局部注射治疗肌腱病的可行性研究[J];实用骨科杂志;2010年04期

8 汪心毅;吉霖;张落舟;王忍;汪雪君;;指肌腱末端断裂绕指骨缝合法及实验室研究[J];骨科;2011年04期

9 许丛玉;;按摩加中频治疗腓肠肌腱综合征临床观察[J];按摩与导引;2006年08期

10 邓凯;张成琪;孙丛;柳澄;王广丽;;双能CT观察手、足肌腱[J];中国医学影像技术;2010年06期

中国重要会议论文全文数据库 前3条

1 陈涧新;;超声在手肌腱的临床应用探讨[A];中国超声医学工程学会第三届全国肌肉骨骼超声医学学术交流会论文汇编[C];2011年

2 姬树青;马剑雄;马信龙;马玉仓;朱少文;;糖皮质激素局部注射治疗肌腱病可行性研究[A];2009第十七届全国中西医结合骨伤科学术研讨会论文汇编[C];2009年

3 杨运发;徐达传;;L-PRP对体外培养的肌腱干细胞(TSCs)影响的研究[A];中国解剖学会2013年年会论文文摘汇编[C];2013年

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1 中国中医科学院望京医院 张磊;推拿治疗肌腱病变[N];健康报;2008年

2 上海第六人民医院超声医学科副主任医师 朱家安邋顾海鹰 整理;运动损伤 超声诊断[N];健康报;2008年

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1 瞿瑾;胰酶化和钙化对异体滑膜内肌腱与骨隧道愈合作用研究[D];中南大学;2014年

2 倪明;骨髓间充质干细胞的成肌腱分化促进肌腱愈合的实验研究[D];中国人民解放军军医进修学院;2012年

3 倪明;骨髓间充质干细胞的成肌腱分化促进肌腱愈合的实验研究[D];中国人民解放军医学院;2011年

4 陈磊;富血小板血浆诱导肌腱干细胞增殖分化对肌腱微损伤修复的作用[D];第三军医大学;2012年

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6 张立宁;跟腱损伤与修复评价及机制探讨[D];中国人民解放军医学院;2014年

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1 庞坤;富血小板血浆复合脂肪干细胞修复兔肌腱病变的实验研究[D];大连医科大学;2012年

2 王君君;宝石能谱CT在手足肌腱病变中的初步应用[D];山东大学;2012年

3 李伟;MRI和CT能谱成像在手足肌腱病变中的应用及对照分析[D];山东大学;2012年

4 杨广华;机械牵伸频率对肌腱干细胞增殖分化的影响[D];第三军医大学;2014年

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本文编号：1230425