肺保护液灌注猪供肺后低温保存肺泡细胞凋亡的动态观察

发布时间：2017-12-06 00:05

  本文关键词：肺保护液灌注猪供肺后低温保存肺泡细胞凋亡的动态观察

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【摘要】：目的 研究离体猪肺经Celsior液灌注后低温保存中肺组织细胞凋亡的动态过程,及细胞凋亡、坏死与肺组织损伤的相关性。方法采用巴马小香猪双肺离体冷缺血模型,分别于离体低温保存0h、8h、12h、24h取肺组织标本：通过测定肺组织干/湿重比、透射电镜观察组织细胞亚显微结构及形态改变,以判断凋亡是否发生；通过PCR检测肺组织中凋亡基因caspase-3的表达水平及TUNEL法测定肺泡细胞凋亡水平；通过HE染色检测肺组织细胞死亡率,并结合上述凋亡率计算出细胞坏死率。结果1.供肺湿/干重(W/D)随着低温保存时间的延长呈递增的趋势,保存8h、12h、24h显著高于保存Oh(P0.05)。HE染色供肺死亡率随保存时间延长逐渐增加,保存8h、12h、24h显著高于保存0h(P0.05)。Tunel法供肺组织凋亡率随保存时间的延长线增高后降低,在保存12h到达峰值,保存8h、12h、24h凋亡率显著高于保存Oh(P0.05),且保存8h、12h、24h组间差异具有统计学意义(P0.05),但保存12h与保存24h差异无统计学意义(P0.05)。细胞内Caspase-3的表达水平先增高后降低,在保存8h后逐渐增高(F=11.16),保存12h后表达量逐渐下降。透射电镜下保存8h开始出现凋亡,保存12h后超微结构变化明显,可见大量早中期凋亡细胞,保存24h后细胞凋亡较保存12h变化不明显,但出现大量凋亡晚期细胞。结论：1.供肺经器官保存液灌注后低温保存,随保存时间延长凋亡率先增高后降低,在保存12h后达到峰值。2.供肺保存24h,供肺W/D与细胞死亡关系显著,其中保存0～8h,肺缺血性损伤与细胞凋亡显著相关；保存12～24h,肺缺血性损伤与细胞坏死显著相关。3.Caspase-3 RNA逆转录-实时PCR结合Tunel法为更全面、客观地评价细胞凋亡的方法,可反应组织凋亡早、中、晚各期总体凋亡情况。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R655.3

【参考文献】

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本文编号：1256641