高压氧联合氢水用于胸部战创伤后严重肺损伤治疗的基础研究

发布时间：2018-02-01 09:37

本文关键词： 胸部创伤严重肺损伤高压氧氢水凋亡　出处：《第二军医大学》2017年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：1、研究目的肺损伤是胸部战创伤中最严重的损伤之一,治疗方法有限。高压氧治疗可以迅速增加动脉血氧含量、提高Pa O2,迅速改善各器官组织缺氧,减少酸性代谢产物,恢复各器官功能。氢气是一种优质的抗氧化物质,近几年,关于氢气的抗氧化、抗炎症反应的研究逐渐成为热点。目前文献无两者联合治疗肺损伤的研究报道。本研究基于以上的理论基础和文献参考,探讨两者联合用于战创性急性肺损伤治疗的可行性,并探讨相应的干预措施。查阅相关文献和多次实验发现,胸部创伤模型变量多,对实验结果产生较大偏差,因此我们利用成熟的呼吸道吸入脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)技术制造出严重肺损伤模型,利用该模型模拟胸部创伤后急性肺损伤。建模成功后,通过给大鼠单独注射氢气饱和生理盐水溶液、单独高压氧治疗以及联合两者治疗的方法,观察肺组织病理改变及炎细胞浸润情况,测定血清及肺组织中的炎性因子水平、肺组织细胞凋亡率改变及肺组织中抗氧化酶水平变化。通过以上指标的观察,以确定饱和氢水联合高压氧对于肺损伤的作用,明确氢水联合高压氧治疗对严重肺损伤的治疗意义,为临床肺损伤治疗方法的建立提供理论依据。2、研究方法成年雄性Sprague-Dawlay大鼠40只,体重约为(240士10)g,随机分成5组(n=8/组),分别为对照组(sham组)、LPS组、LPS组+高压氧组(LPS+O2组)、LPS组+饱和氢水组(LPS+H_2)组、LPS组+高压氧+饱和氢水组(LPS+O2+H_2)组,每组8只。Sham组气管内注射与实验组同等剂量的生理盐水,正常饲养;LPS组按体重3mg/kg气管内注射LPS试剂制造肺损伤模型,建模成功后正常饲养;LPS+O2组在建模后1小时给予2.5ATA纯氧治疗120分钟,每12小时治疗一次,连续治疗3天;LPS+H_2组在建模成功后1小时,大鼠按体重5ml/kg腹腔内注射饱和氢水,每12小时后重复腹腔给药一次,连续治疗3天;LPS+O2+H_2组在建模1小时后,先给予饱和氢水5ml/kg腹腔注射,然后立即把实验动物放入高压舱给予2.5ATA纯氧加压治疗120分钟,每12小时给予腹腔注射饱和氢水和高压氧治疗,3日后取标本。比较肺组织湿干重比,检测各组大鼠血清、肺组织和肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,检测血清和肺组织中MDA含量和SOD活性,TUNEL法测量肺组织内细胞凋亡情况,光镜下观察肺组织病理改变,计算凋亡指数。3、研究结果:(1)大鼠肺湿干重比:和LPS组肺组织湿/干比相比,LPS+O2组、LPS+H_2组、LPS+O2+H_2组的肺组织湿/干比降低,具有统计学意义(P0.05),LPS+O2组、LPS+H_2组、LPS+O2+H_2组之间比较没有统计学差异。(2)病理观察:sham组大鼠肺泡腔结构完整、均一,四壁光滑,未见腔内有红白细胞浸润。LPS组可见大鼠肺泡结构破坏,肺间质增厚明显,间质内见大量白细胞,肺泡腔内可见出血及白细胞浸润。LPS+O2组和LPS+H_2组肺泡壁增厚,肺泡及间质亦可见白细胞浸润,病理评分低于LPS组。LPS+O2+H_2组与LPS+O2组、LPS+H_2组之间病理评分无统计学差异。(3)肺组织匀浆中MDA含量:LPS+O2组、LPS+H_2组、LPS+O2+H_2组中MDA含量低于LPS组(P0.05),但各组之间无差异。肺组织中SOD活力:LPS+O2组、LPS+H_2组、LPS+O2+H_2组活性大于LPS组(P0.05),低于sham组(P0.05)。(4)肺组织及血清中TNF-α、IL-1β、IL-6检测:IL-1β在肺组织及血清中LPS+O2组、LPS+H_2组、LPS+O2+H_2组中均低于LPS组(P0.05)。TNF-α、IL-6在肺组织及血清中差异不明显,可能与取材时间有关。(5)肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β含量:LPS+O2组、LPS+H_2组、LPS+O2+H_2组中含量低于LPS组(P0.05),高压氧和氢水组、氢氧联合组之间无统计学差异。(6)细胞凋亡:LPS组和sham组有明显统计学差异(P0.0001),单用氢水、单用高压氧、氢氧联合均与LPS组存在显著差异(P0.05);LPS+H_2与LPS+H_2+O2亦有显著差异(P=0.00120.05),可见氢水联合高压氧治疗对减少细胞凋亡具有协同作用。4、结论1、富氢盐水可通过减少致炎因子,促进抗氧化酶活性,降低肺组织氧化应激,减少肺细胞凋亡,对LPS导致的急性肺损伤起到保护作用。2、高压氧可通过减轻肺组织炎性物质的释放,减少氧化产物的堆积,减少肺细胞凋亡,对LPS导致的急性肺损伤有治疗作用。3、高压氧联合氢水治疗急性肺损伤在减少细胞凋亡方面具有协同作用。在炎症因子表达和炎性产物生成方面,氢水和高压氧联合应用与单独使用比较有下降趋势。
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【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R655

【参考文献】