NDRG2对肠缺血再灌注肺损伤中肺保护机制的研究

发布时间：2018-02-27 23:47

  本文关键词： 下游调节基因2 核转录因子 kappa B 肠缺血再灌注肺损伤 信号传导通路　出处：《第四军医大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：研究背景： 尽管现代医学科学发展迅猛，医疗方法不断建立和发展完善，但是急性肺损伤（Acute lung injury，ALI）仍是一种危重的临床综合征，致死率高。肠缺血再灌注（intestinal ischemia/reperfusion，II/R）是导致肠移植、心肺转流、创伤与出血等多种临床并发症造成器官损伤的主要原因[1-4]。研究表明，肠缺血再灌注损伤致使肠粘膜结构和绒毛皱缩以及上皮功能逐渐减退，最终导致肠屏障功能完整性破坏和细菌迁移[1,5,6]。进一步研究发现II/R同样是导致多器官功能障碍综合征（Multiple OrganDysfunction Syndrome，MODS）尤其是急性呼吸窘迫综合症（Acute RespiratoryDistress Syndrome，ARDS）的重要发病机理[2,3]。然而，II/R导致肺损伤更全面清晰的机制尚未完全研究清楚。 核转录因子-kappa B（Nuclear factor-kappa B，NF-κB）蛋白能够介导多种基因在免疫、急性炎症反应、细胞粘附、分化、氧化应激和凋亡的表达[7,8]。其在II/R引起的局部和全身炎症反应发挥重要的作用[9,10]。因此，研究NF-κB信号传导通路的调控机制是治疗II/R肺损伤的新策略[11,12]。 N-myc下游调节基因2（N-myc downstream regulated gene2，NDRG2）是NDRG家族基因（包括NDRG1-4）之一，广泛分布于多种组织和器官中,正常表达于肺泡间质与肺泡上皮细胞[13]。NDRG2的过表达可显著降低Iκκα/β复合体磷酸化，从而阻断IκBα磷酸化和p65核移位，抑制NF κB信号传导通路活化，最终抑制肿瘤细胞的生长[14]。相关研究也证实，NDRG2和NF-κB在心肌细胞、莱氏细胞中也均有重要的作用[15,16]。 实验目的： 通过建立大鼠肠缺血再灌注肺损伤（Intestinal ischemia/reperfusion induced lunginjury，II/RI）模型，检测NDRG2在肺组织中的表达，初步分析NDRG2与NF-κB信号传导通路在肠缺血再灌注肺损伤中的相关性。进一步为再灌注损伤的临床诊断、治疗等各方面提供新的理论依据。 实验方法： 1.采用免疫组织化学、Western-blot蛋白免疫印迹方法，检测NDRG2及NF-κB在肠缺血再灌注肺损伤中的蛋白定位及表达情况。 2.采用RT-PCR法，检测NDRG2及NF-κB在肠缺血再灌注肺损伤中的mRNA表达量。 3.分析NF-κB与NDRG2两者的表达量是否具有相关性。 4.TUNEL法检测再灌注损伤致细胞凋亡情况，探讨缺血再灌注肺损伤是否促进NF-κB传导通路活化，诱导细胞凋亡。 实验结果： 1.免疫组化、Western-blot蛋白免疫印迹结果显示：NDRG2在肠缺血再灌注肺损伤中表达减低，与对照组差异性显著（P0.05）；NF-κB在肠缺血再灌注肺损伤中表达明显升高（P0.05），与对照组差异性显著，有统计学意义。 2. RT-PCR法显示：NDRG2mRNA表达水平在实验组中明显降低（P0.05）；NF-κBmRNA表达量增加，与对照组差异性显著（P0.05），有统计学意义。 3.NDRG2和NF-κB两种蛋白表达的相关性检验，二者呈显著负相关（r=-0.814,P0.05），有统计学意义。 4.TUNEL染色，I/R组凋亡指数依次分别为（16.21±1.34）%、（37.91±2.15）%、（24.15±2.43）%、（17.15±2.53）%与Control组（1.21±0.71）%相比凋亡细胞明显升高，结果有统计学意义（P＜0.05）。 实验结论： 肠缺血再灌注肺损伤中明显存在肺组织NDRG2表达量降低，而且，NDRG2表达降低的同时肺组织NF-κB表达量明显增强，，提示NDRG2在NF-κB信号转导通路在肠缺血再灌注肺损伤中可能发挥重要作用。NDRG2可能是调控缺血再灌注肺损伤的新靶点。
[Abstract]:Background of Study : In spite of the rapid development of modern medical science and the continuous development and improvement of medical methods , acute lung injury ( ALI ) is still a critical clinical syndrome , and the death rate is high . Intestinal ischemia / reperfusion ( II / R ) is the main cause of organ damage due to intestinal ischemia / reperfusion ( intestinal ischemia / reperfusion , II / R ) . Nuclear factor kappa B ( NF - 魏B ) protein can mediate the expression of various genes in immune , acute inflammatory reaction , cell adhesion , differentiation , oxidative stress and apoptosis . The N - myc downstream regulated gene 2 ( NDRG2 ) is one of the NDRG1 - 4 genes ( including NDRG1 - 4 ) , which is widely distributed in various tissues and organs , and is normally expressed in alveolar stroma and alveolar epithelial cells . NDRG2鐨勮繃琛ㄨ揪鍙�鏄捐憲闄嶄綆I魏魏伪/尾澶嶅悎浣撶７閰稿寲,浠庤

本文编号：1544847