高压电烧伤大鼠血清TSP、vWF变化及乌司他

发布时间：2018-03-03 02:15

  本文选题：烧伤　切入点：电　出处：《河北医科大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：高压电烧伤是一种特殊原因的烧伤，无论其面积大小，均可在创面局部和(或)全身远隔组织、器官出现微循环紊乱。电流通过机体时主要沿电阻较小的血液和神经走行，故电流对血管损伤极为明显。对于微血管，电流可直接损伤其内皮细胞，引起血管内皮系统释放血管活性物质，导致致炎状态、高凝状态的发生及微血管通透性增强，血管内白细胞与内皮细胞黏附增加、红细胞聚集、微血栓形成以及血液黏度增加等，从而影响微循环血液流动，导致机体微循环障碍。已有实验证明，血小板反应蛋白（TSP）对血管修复及生成有抑制作用，血管性假性血友病因子（vWF）是血管内皮细胞受损的重要标志之一。本实验目的在于通过观察高压电流对TSP、vWF的影响，进一步探讨高压电烧伤对内皮细胞损伤引起机体微循环紊乱的机制及乌斯他丁（UTI）、甲基强的松龙（MP）对血清TSP、vWF表达的干预作用，为高压电烧伤后微循环障碍的防治提供实验依据。 方法： 1实验动物分组：健康成年SD大鼠（河北医科大学动物实验中心提供，合格证编号1211057）240只，雌雄不拘，按随机数字表法分成四组，即假高压电烧伤组（简称对照组)、高压电烧伤组（简称电伤组）、高压电烧伤UTI治疗组（简称治疗1组），高压电烧伤MP治疗组（简称治疗2组），每组各60只，以上四组又分别分为电伤前15min、电伤后5min、1h、2h、4h、8h6个不同的时相，，每时相10只。 2实验前准备：将大鼠编号、称重、左上肢、右下肢及前胸脱毛。按所需浓度配制实验药品。 3高压电烧伤模型制作：先检查输入电源总开关，保证其处于关闭状态，然后正确连接实验变压器和调压器导线。用1%戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉大鼠（40mg/kg），麻醉成功后，将大鼠仰卧于专用电击实验台上，将两个1cm×1cm电极片分别固定于大鼠的左上肢（电流入口）、右下肢（电流出口）脱毛区。接通输入电源总开关，调整调压器使升压器输出电压升至2kV，然后连接升压器输出端电源，使高压电流通过大鼠身体，保持电击时间持续3s，流经大鼠的电流强度为（1.85±0.25）A。对照组大鼠给予只连导线而不通电的方法，制作假电伤模型。电伤5min内，治疗1组腹腔内注射UTI溶液（5×104u/kg，即按7mL/kg给药），治疗2组腹腔内注射MP溶液（750mg/kg，即按6mL/kg给药），对照组及电伤组腹腔内注射相等量生理盐水。 4标本采集与保存：将模型复制成功的大鼠开胸暴露心脏，直视下心脏采血约6mL，静置30min，待血清析出后上离心机，以3000转/min离心10min，取上清液置于Eppendorf管中在-70℃条件下保存。 5指标检测：采用ELISA双夹心抗体法，分别检测每组大鼠六个时相组血清TSP、vWF含量。 6实验数据处理：采用SPSS13.0统计软件，行两因素析因设计的方差分析，以p＜0.05为显著性检验水准。 结果：1大鼠血清TSP含量变化 电伤组TSP含量总体高于对照组（主效应F＝62.54，P＜0.001）；电伤组TSP含量受伤后时间变量影响（F＝3.52，P＜0.01），伤后5min～8h各时相均高于本组伤前值（P＜0.01），至伤后4h达最高值，为（163.28±38.28）ng/mL，高于伤前的（108.91±25.07）ng/mL，8h后逐渐回落，但仍维持较高水平。 UTI治疗组TSP含量总体低于电伤组（主效应F＝23.05，P＜0.001）；治疗1组血清TSP含量在伤后5min仍高于电伤前15min水平，其差异有显著性（P＜0.05），伤后4hUTI治疗组TSP的含量基本恢复至电伤前15min的水平，无显著性差异（P＞0.05）。 MP治疗组TSP含量总体低于电伤组（主效应F＝171.49，P＜0.001）；治疗2组受伤后时间变量影响（主效应F＝2.76，P＜0.05），治疗2组伤后5min、1h、2h、4h、8h各时相均明显低于本组伤前值（P＜0.01）。2大鼠血清vWF含量变化 电伤组vWF含量总体高于对照组（主效应F＝103.52，P＜0.001）；电伤组vWF含量受伤后时间变量影响（主效应F＝5.20，P＜0.001），伤后5min～8h各时相均高于本组伤前值（P＜0.001），伤后即刻达最高值，后随时间呈下降趋势，至伤后8h仍高于对照组水平。 治疗1组vWF含量总体低于电伤组（主效应F＝4.04，P＜0.05），治疗1组vWF含量受伤后时间变量影响（主效应F＝7.45，P＜0.001），伤后5min～8h各时相均高于本组伤前值（P＜0.001），随时间呈逐渐下降趋势，但伤后8h仍维持较高水平。 治疗2组vWF含量总体低于电伤组（主效应F＝44.29，P＜0.001）；治疗2组vWF含量受伤后时间变量影响（主效应F＝4.73，P＜0.01），伤后5min、1h、2h、4h时相均高于本组伤前值（P＜0.001），至治疗8hvWF基本恢复至电击前水平。 结论： 1高压电烧伤可引起大鼠血清TSP含量升高，且在伤后4h达到最高值。 2高压电烧伤可引起大鼠血清vWF含量升高，且在伤后8h呈下降趋势。 3高压电刺激机体产生TSP、vWF含量增加，导致机体微循环障碍。 4UTI、MP可抑制大鼠高压电烧伤后血液TSP、vWF的生成，从而减轻大鼠电伤后内皮细胞通透性、减轻损伤处水肿等，从而改善微循环血流障碍。
[Abstract]:Purpose: high voltage electric burn is a special burn, regardless of their size, can be found in the local wound and (or) body distant tissue, organ microcirculation dysfunction. Current through the body along the small resistance of blood and nerves, so the current of vascular injury is very obvious. The microvascular. The current can directly damage the endothelial cells induced by vascular endothelial system release of vasoactive substances, causing inflammation, occurrence of hypercoagulable state and microvascular permeability and vascular adhesion of leukocytes and endothelial cells increased, erythrocyte aggregation, thrombus formation and increase blood viscosity, thereby affecting the microcirculation blood flow, resulting in microcirculation obstacles. It has been proved that thrombospondin (TSP) inhibits vascular repair and generation, von Willebrand factor (vWF) is the heavy damage to vascular endothelial cells To be one of the signs. The purpose of this experiment is to observe the high voltage current of TSP, the influence of vWF, to further explore the high-voltage electric burn on endothelial cell injury and the mechanism of body'smicrocirculation disorder caused by ulinastatin (UTI), methylprednisolone (MP) on serum TSP, vWF expression in the intervention, to provide experimental basis for prevention and control for high voltage electric burn microcirculation.
Method锛

本文编号：1559106