当前位置:主页 > 医学论文 > 急救学论文 >

Sirt1在脓毒血症继发的急性肺和肾损伤中的保护作用

发布时间:2018-08-22 11:04
【摘要】:脓毒血症是一种潜在的致命性的全身炎症反应,也称为系统性炎症反应综合症(SIRS),是一种由严重的感染引起的具有高发病率和死亡率的难治性疾病。脓毒血症同时也可以被认为是从感染到多器官功能损害综合症的一种过度。严重的脓毒血症可以引起衰竭型器官功能异常,临床观察发现脓毒血症患者发展成急性肺损伤(ALI)和急性肾损伤(AKI)的风险很高。目前脓毒血症中器官之间的损伤干扰及其机制的研究越来越受到重视,尤其是涉及到ALI和AKI之间关系的研究。ALI以及其严重模式-急性呼吸窘迫综合症(ARDS)常常导致多器官功能衰竭,临床上的死亡率大约为30%-50%。此外,作为一个天然的血液过滤系统,肾脏成为系统性炎症反应器官损伤的直接靶点。炎症引起的ALI及AKI在老年人中十分常见,通常死亡率较高,而目前研究发现Sirt1在老年人中表达下降。同时也有报道表明Sirt1在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者中的表达下降,所以我们推测Sirt1在炎症调节中起到一定的作用。我们分别用盲肠结扎穿刺手术(CLP)和脂多糖(LPS)引起的脓毒血症来研究Sirt1的对于肺脏和肾脏损伤的作用及其机制。 Sirtuin1(Sirt1)是Sirtuin家族的成员,是最初发现于酵母菌的一种脱乙酰酶。不同于经典的组蛋白脱乙酰途径,Sirt1发挥它的脱乙酰功能是通过对赖氨酸残基的脱乙酰作用来调节其它蛋白质的功能,例如核转录因子kB和p53等。也有越来越多的研究发现Sirt1在炎症、凋亡、抗应激、代谢、分化和老化中起到重要作用,而Sirt1在脓毒血症中作用的相关研究较少,机制尚不明确。在本研究中,我们利用Sirt1敲除鼠来研究其在脓毒血症引起的急性肺肾损伤中的作用,并进一步明确其调节作用机制。我们的实验证明Sirt1敲除鼠对脓毒血症模型引起的ALI和AKI更具有易感性。 在实验的第一部分中,我们主要研究Sirt1对于脓毒血症继发的ALI的作用及其机制。实验中对Sirt1基因敲除及其同源性野生型小鼠进行CLP手术,成功造成小鼠脓毒血症模型。为了明确Sirt1对于肺损伤的作用及其机制,本部分实验从肺中性粒细胞的浸润情况、促炎症的释放和Sirt1调节机制三方面进行研究。为了了解中性粒细胞浸润情况,我们检测了CLP术后24小时肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)的活性。随后我们应用试剂盒检测造模后6小时和24小时后的血清中及肺组织中IL-6和TNF-α水平,结果显示Sirt1基因敲除明显增加MPO的活性,并且提高了促炎症因子的水平。为了进一步了解Sirt1调节肺内炎症的机制,我们应用western blot检测Sirt1调节的直接和间接靶点蛋白在肺内的表达。外源性和内源性感染因子进入到体内后,促进了NF-kB的活化,随后调节各种炎症介质的转录,最终导致不可逆的过度的炎症反应发生。我们的研究证明了Sirt1基因敲除鼠的肺内NF-kB的活化增强,同时其下游黏附分子-细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞外调节激酶1/2(ERK1/2)和信号转导转录激活因子3(stat3)以及caspase3,caspase7的表达明显增加。以上实验结果证明Sirt1敲除通过触发过度的炎症以及相关炎症复合物途径而使肺损伤增强。 在第二部分实验中,我们主要研究Sirt1在调节脓毒血症继发的肾损伤中的作用及其机制。我们应用LPS诱导小鼠建立脓毒血症模型。首先通过血清尿素氮(BUN)和尿液肾脏损伤分子(KIM-1)的检测显示在脓毒血症中肾脏功能明显受损。进一步的组织学检测发现脓毒血症也引起肾小管的损伤和炎症。肾脏的炎症与促炎症介质的产生增加与黏附分子的上调(例如ICAM-1和VCAM-1)有密切关系。这些早期的炎症反应在肾损伤的过程中引起炎症细胞的浸润,而过度的炎细胞浸润则可引起进一步的肾损伤。在炎症因子的调节过程中NF-kB调节各种炎症因子的转录,进而影响炎症反应进程,本部分研究发现Sirt1基因敲除导致NF-kB的活化,随后活化的NF-kB引起包括IL-6和TNF-α在内的细胞因子的增加,这些炎症因子的增加是AKI的明显标志。同时细胞因子也可以引起信号通路的活化,,例如Stat3和ERK1/2调节的级联反应等途径。以上实验证明Sirt1在脓毒血症引起的AKI中具有保护作用,并通过调节NF-kB的活化产生其保护机制。 综上所述,Sirt1在脓毒血症引起的急性肺肾损伤中发挥保护作用。Sirt1发挥它的保护功能主要是通过对核转录因子的活化的调控,继而引发Stat3,ERK1/2、caspase等炎症通路的活化。因此我们的研究表明Sirt1是一个潜在的脓毒血症引起的肺肾损伤的治疗靶点。
[Abstract]:Sepsis is a potentially fatal systemic inflammatory response, also known as systemic inflammatory response syndrome (SIRS), a refractory disease with high morbidity and mortality from severe infections. Sepsis can also be considered an excess from infection to multiple organ dysfunction syndrome. Sepsis can cause organ dysfunction of failure type. Clinical observation shows that patients with sepsis have a high risk of developing acute lung injury (ALI) and acute kidney injury (AKI). Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS), a severe form of ARDS, often leads to multiple organ failure (MOF) with a clinical mortality rate of about 30% - 50%. In addition, as a natural blood filtration system, the kidney becomes a direct target for organ damage in systemic inflammatory reactors. The expression of Sirt1 was decreased in the elderly. It was also reported that the expression of Sirt1 was decreased in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD), so we speculated that Sirt1 might play a role in the regulation of inflammation. We used cecum ligation puncture (CLP) and lipopolysaccharide (LPS) to induce sepsis, respectively. To study the effect and mechanism of Sirt1 on lung and kidney injury.
Sirtuin 1 (Sirt1), a member of the Sirtuin family, is a deacetylase first discovered in yeast. Unlike the classical histone deacetylation pathway, Sirt1 exerts its deacetylation function by deacetylating lysine residues to regulate other protein functions, such as nuclear transcription factors kB and p53. Sirt1 has been found to play an important role in inflammation, apoptosis, anti-stress, metabolism, differentiation and aging, while the role of Sirt1 in sepsis has not been well understood. In this study, we used Sirt1 knockout mice to study its role in acute lung and kidney injury induced by sepsis and to further clarify its regulation. Our experiments showed that Sirt1 knockout mice were more susceptible to ALI and AKI induced by sepsis.
In the first part of the experiment, we mainly studied the effect and mechanism of Sirt1 on ALI secondary to sepsis. In the experiment, we performed CLP on the wild type mice with Sirt1 gene knockout and its homology, and successfully induced sepsis model in mice. To understand the infiltration of neutrophils, we examined the activity of myeloperoxidase (MPO) in lung tissue homogenate 24 hours after CLP. Then we used kits to detect IL-6 in serum and lung tissue 6 hours and 24 hours after CLP. In order to further understand the mechanism of Sirt1 regulating pulmonary inflammation, we used Western blot to detect the expression of Sirt1-regulated direct and indirect target proteins in the lung. Our study demonstrated that the activation of NF-kB in the lungs of Sirt1 knockout mice was enhanced, and the downstream adhesion molecule-intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-1) were fine. The expression of extracellular regulated kinase 1/2 (ERK1/2), signal transduction activator 3 (stat3), caspase 3, and caspase 7 were significantly increased. The above results demonstrated that Sirt1 knockout enhanced lung injury by triggering excessive inflammation and related inflammatory complex pathways.
In the second part of the experiment, we mainly studied the role and mechanism of Sirt1 in regulating renal injury secondary to sepsis. We established sepsis model in LPS-induced mice. First, the detection of BUN and KIM-1 in serum showed that renal function was significantly impaired in sepsis. Histological examination revealed that sepsis also caused renal tubular injury and inflammation. Increased inflammation and the production of pro-inflammatory mediators were closely related to the up-regulation of adhesion molecules (such as ICAM-1 and VCAM-1). These early inflammatory reactions caused infiltration of inflammatory cells during renal injury, whereas excessive infiltration of inflammatory cells could be induced. NF-kB regulates the transcription of various inflammatory factors during the regulation of inflammatory factors, thereby affecting the process of inflammation. Sirt1 knockout leads to the activation of NF-kB, and subsequently activated NF-kB leads to the increase of cytokines including IL-6 and TNF-alpha, which is the result of AKI. Significant markers. Cytokines can also activate signaling pathways, such as the cascade of Stat3 and ERK1/2. These experiments have shown that Sirt1 has a protective effect on AKI induced by sepsis and produces its protective mechanism by regulating the activation of NF-kB.
To sum up, Sirt1 plays a protective role in acute lung and kidney injury induced by sepsis. Sirt1 exerts its protective function mainly by regulating the activation of nuclear transcription factors, which in turn leads to the activation of inflammatory pathways such as Stat3, ERK1/2 and caspase. Therapeutic targets for injury.
【学位授予单位】:吉林大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R459.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 张惠珍,朱玲t ;慢性肉芽肿1例报告[J];临床儿科杂志;1991年04期

2 杜隽铭;一氧化氮延迟吸入法保护革兰阴性脓毒血症猪肺泡毛细血管膜完整性[J];国外医学.骨科学分册;1997年04期

3 邓烈华,姚华国,邵义明;血必净对脓毒血症患者前降钙素影响的临床观察[J];实用医技杂志;2005年12期

4 林玲,蔡秀军;脓毒血症患者外周血白细胞凋亡与病情及预后关系[J];中国急救医学;2005年11期

5 朱志云;李凌;叶纪录;;早期中心静脉血氧饱和度监测在严重脓毒血症与感染性休克中的意义[J];现代医药卫生;2008年20期

6 盛虹;曹伟新;;鱼油在脓毒血症中的应用[J];上海交通大学学报(医学版);2010年01期

7 金杰波;周军;陈双;;甲亢治疗后继发脓毒血症合并肠外瘘1例报道[J];岭南现代临床外科;2010年02期

8 赵湛元;肖倩霞;张志刚;;血乳酸动态监测对脓毒血症预后的临床意义[J];临床医药实践;2010年14期

9 宋红梅;张泰标;;血必净注射液治疗脓毒血症临床观察[J];中国中医急症;2010年08期

10 闵安如;王伟明;龙连圣;;重型颅脑伤并发肠源性脓毒血症的临床分析[J];南京部队医药;2000年05期

相关会议论文 前10条

1 王春亭;孟玫;蒋进皎;张继承;任宏生;楚玉峰;曾娟;孟冲;郄国强;于结滨;;连续性高容量血液滤过对脓毒血症可溶性黏附分子的影响[A];第三届重症医学大会论文汇编[C];2009年

2 崔微艳;陆洁;邹静蓉;何玉峰;;63例重症脓毒血症的临床分析[A];“2008灾害创伤与急救新进展”学术交流会学术论文集[C];2008年

3 卢中秋;李景荣;卢才教;程俊彦;黄唯佳;周铁丽;李秉熙;陈雷;;弧菌性脓毒血症的早期临床诊断与治疗[A];中华医学会急诊医学分会第十次全国复苏中毒学术论文交流会论文汇编[C];2004年

4 冯思霞;汪杨;李玉香;王峰;;瘤型麻风合并脓毒血症1例[A];第二届传染病诊治高峰论坛暨2009年浙江省感染病、肝病学术年会论文汇编[C];2009年

5 刘小彭;高新;周祥福;温星桥;狄金明;蒲小勇;王德娟;司徒杰;;输尿管急性梗阻伴脓毒血症的急诊处理(附72例报告)[A];第十七届全国泌尿外科学术会议论文汇编[C];2010年

6 蒋丽;;核因子-κB活化在大鼠脓毒血症胃肠黏膜屏障中的作用[A];中华医学会急诊分会第五届全国危重病学术交流会论文汇编[C];2004年

7 马中富;翟诚顺;梁艳冰;詹红;唐皓;叶海宁;;脓毒血症大鼠心肌细胞凋亡及其机制研究[A];2005年全国危重病急救医学学术会议学术论文集[C];2005年

8 胡静;陆国平;陆铸今;卢亚芳;贺骏;张灵恩;;新生儿脓毒血症血液净化的护理[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

9 胡静;陆国平;陆铸今;卢亚芳;贺骏;张灵恩;;新生儿脓毒血症血液净化的护理[A];2006(第三届)江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年

10 高巨;;中西医结合对脓毒血症发病机制和治疗的进展[A];中国中西医结合学会围手术期专业委员会成立大会暨第二届全国中西医结合围手术期医学专题研讨会论文集[C];2007年

相关重要报纸文章 前10条

1 本报记者 东辰;礼来脓毒血症新药获准欧洲上市[N];中国高新技术产业导报;2002年

2 力信 小涛;生物工程点石成金 人体蛋白也成良药[N];医药经济报;2002年

3 本报记者 孙晨 中国金药网联合报道;“第一”——礼来追求的竞争高标[N];中国高新技术产业导报;2002年

4 陶振峰 李晓明;咽源性纵隔脓肿的诊治[N];中国中医药报;2004年

5 杨冉;痔疮的危害[N];医药经济报;2003年

6 ;感染性疾病检测酝酿革命[N];中国医药报;2002年

7 骆景铭;秋疖的防治[N];中国中医药报;2001年

8 北京协和医院老年示范病房 曲璇 朱鸣雷 刘晓红;生命终点,选择尊严[N];健康报;2011年

9 王晓丽;年轻女性患阑尾炎治疗要彻底[N];农村医药报(汉);2009年

10 杜长明;少女阑尾炎应尽早切除[N];大众卫生报;2002年

相关博士学位论文 前10条

1 高蓉;Sirt1在脓毒血症继发的急性肺和肾损伤中的保护作用[D];吉林大学;2014年

2 谢俊然;羟乙基淀粉130/0.4对脓毒血症大鼠全身抗炎作用及相关机制研究[D];浙江大学;2010年

3 唐e

本文编号:2196904


资料下载
论文发表

本文链接:https://www.wllwen.com/yixuelunwen/jjyx/2196904.html


Copyright(c)文论论文网All Rights Reserved | 网站地图 |

版权申明:资料由用户0b6b6***提供,本站仅收录摘要或目录,作者需要删除请E-mail邮箱bigeng88@qq.com