肝移植急性排斥大鼠肠道双歧杆菌种群结构变化特征的研究

发布时间：2018-11-24 18:46

【摘要】：目的利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)及荧光定量PCR等方法对肝移植急性排斥及相关干预(抗生素、益生菌)大鼠肠道双歧杆菌种群结构变化及其多样性特征进行研究,以期发现与肝移植急性排斥反应相关的双歧杆菌菌种。方法将纯系雄性Lewis大鼠24只和BN大鼠42只按如下分组： (1)假手术组(n=6)：正常BN大鼠,只打开腹腔便缝合； (2)同基因肝移植组(n=6)：供、受体各6只,均采用BN大鼠； (3)异基因肝移植组(n=6)：Lewis大鼠6只为供体,BN大鼠6只为受体； (4)抗生素组(n=6)：异基因肝移植(Lewis-BN)+2ml庆大霉素灌胃(4万单位)； (5)益生菌组(n=6)：异基因肝移植(Lewis-BN)+2ml益生菌培菲康(长双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、粪链球菌三联活菌胶囊,2.0×10(?)8CFU/ml)灌胃。上述大鼠肝移植利用改良的Kamada二套袖法,从而构建肝移植排斥反应大鼠模型,分别于术前1天、术后1周和术后2周的采集粪便标本,2周后处死大鼠采集肝脏组织及腔静脉血用于分析肝脏病理改变、肝功能水平及血浆内毒素水平,并利用巢式PCR-DGGE、RT-PCR等分子生物学实验技术分析不同时间段肠道双歧杆菌种群结构变化。结果 (1) DGGE图谱显示：术前1天,除益生菌组外,各组双歧杆菌多样性无显著性差异；益生菌组多样性相比异基因组多样性下降(P0.05)。术后1周,和对照组、同基因组相比,异基因组双歧杆菌多样性下降(P0.05)；相比异基因组,抗生素组多样性升高(P0.05),益生菌组多样性下降(P0.05)。术后2周,对照组、同基因组和异基因组之间双歧杆菌多样性无差异；相比异基因组,抗生素组多样性升高(P0.05),益生菌组多样性下降(P0.05)。 (2)术前1天,对照组、同基因组、异基因组大鼠各种双歧杆菌含量均无统计学差异；与异基因组相比,抗生素组总双歧杆菌、长双岐杆菌、小链双歧杆菌、两双歧杆菌含量下降(P0.05)；而经过培菲康灌胃后,益生菌组总双歧杆菌、长双歧杆菌、小链双歧杆菌明显增加(P0.05)。术后1周,与对照组相比,同基因组齿双歧杆菌含量有所增加(P0.05),异基因组总双歧杆菌、小链双歧杆菌、动物双歧杆菌含量减少(P0.05),齿双歧杆菌增加(P0.05),同时,异基因组相比同基因组,小链双歧杆菌有所下降；和异基因组相比,抗生素组总双歧杆菌、长双歧杆菌、小链双歧杆菌及动物双歧杆菌含量下降(P0.05),而益生菌组总双歧杆菌、长双歧杆菌、动物双歧杆菌含量增加(P0.05)。术后2周,和对照组相比,同基因组齿双歧杆菌含量上升(P0.05)；异基因组小链双歧杆菌、动物双歧杆菌含量下降(P0.05),齿双歧杆菌含量上升(P0.05)。此外,异基因组相比同基因组小链双歧杆菌有所下降(P0.05)。和异基因组相比,抗生素组总双歧杆菌、长双歧杆菌、小链双歧杆菌、婴儿双歧杆菌含量下降(P0.05)；益生菌组总双歧杆菌、长双歧杆菌、小链双歧杆菌、动物双歧杆菌上升(P0.05)。结论 (1)肝移植急性排斥反应可造成大鼠肠道双岐杆菌结构变化,主要表现为双歧杆菌多样性下降,总双歧杆菌、长双歧杆菌、小链双歧杆菌等种类含量的下降及齿双歧杆菌含量的上升。 (2)应用抗生素和益生菌处理肝移植大鼠可减轻移植排斥反应,并在一定程度上恢复肠道双歧杆菌的结构。抗生素可造成移植大鼠肠道双歧杆菌多样性的上升,同时引起双歧杆菌总量及长双歧杆菌、动物双歧杆菌、小链双歧杆菌的含量下降。而益生菌可以降低双歧杆菌的多样性,同时造成双歧杆菌总量及长双岐杆菌、动物双歧杆菌、小链双岐杆菌等的上升。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R657.3

【共引文献】