CD163在慢加急性乙型肝炎肝衰竭及原发性肝癌患者中的表达及临床意义

发布时间：2019-01-26 10:53

【摘要】：中文摘要第一部分CD163在慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者中的表达及临床意义乙型肝炎病毒感染是一个重要的世界卫生问题。它被认为是各种肝脏急慢性疾病的主要病因之一。由于某些病因的急剧发展,一些慢性乙型肝炎(CHB)患者有可能发展为肝衰竭。我们将这些由慢性乙型病毒性肝炎发展而来的肝衰竭称为慢加急性乙型肝炎肝衰竭(ACHBLF),其在所有肝衰竭病因中所占比例高达70%。 ACHBLF的发病机制尚不完全清楚,其死亡率高,预后差,因而降低肝衰竭患者的发病率和死亡率成为研究热点。寻找能预测肝衰竭的生物标志物能加强对患者的监测和治疗,降低ACHBLF患者的发病率和死亡率。目前大量临床研究发现,ACHBLF的发病可能与自身强烈的免疫反应有关,因此,充分理解ACHBLF发病过程的免疫应答十分重要。而CD163及sCD163是近期发现的与急性炎症反应过程密切相关的免疫因子。CD163的研究尚在起步阶段,CD163在ACHBLF患者的免疫过程中可能起到重要作用,但其在ACHBLF患者中扮演的角色尚不完全明确,对诊断及预后评估意义仍未确定,而这正是我们研究的重点及方向。目的：检测ACHBLF患者中外周血单个核细胞表面CD163及外周血血浆中sCD163的表达,明确其在急性炎性反应过程中扮演的角色及临床意义；为临床治疗ACHBLF患者寻找新的临床监测因子。方法： ELISA方法检测ACHBLF患者、CHB患者及正常对照组(HCs)血浆中sCD163的表达水平;流式细胞术检钡ACHBLF患者、CHB患者及HCs外周血单个核细胞CD163的阳性率和CD163平均荧光强度(MFI),应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测量ACHBLF患者、CHB患者及HCs外周血单个核细胞中CD163mRNA的表达。结果： 1、外周血中CD163阳性的单个核细胞比率在ACHBLF患者中要明显高于CHB患者及HCs,具有显著性差异。外周血中CD163MFI在ACHBLF患者中较其他两组升高,但三组无显著性差异。 2、CD163mRNA在ACHBLF患者中的表达要明显高于CHB及HCs,具有显著性差异。 3、血浆中sCD163表达在ACHBLF患者中明显升高,且与患者预后有明显相关,在生存组患者中的血浆sCD163浓度要明显低于死亡组患者sCD163浓度,具有显著性差异。 4、血浆中sCD163表达在ACHBLF患者中与反映患者预后的MELD Score呈正相关,与HBV-DNA正相关,凝血酶原活动度负相关,与总胆红素水平无相关。 5、外周血中CD163阳性的单个核细胞比率在CHB患者中要明显高于HCs,具有显著性差异。 6、CD163mRNA在CHB患者中的表达要高于HCs,但并不具有显著性差异。 7、血浆sCD163表达在CHB患者中明显升高,高于HCs,但是升高幅度远远小于其在其ACHBLF患者中升高幅度,具有显著性差异。结论：作为在巨噬细胞表面特异表达的CD163在ACHBLF患者、CHB患者发病过程中起重要作用,本研究提示CD163与sCD163都可以作为ACHBLF患者有用的标志物,其中sCD163检测更为简单直接,组间差异更为明显,与疾病的严重程度明显相关。CD163与sCD163都可以作为肝衰竭患者预后的评价指标,与患者预后呈负相关。中文摘要第二部分CD163在原发性肝癌患者中的表达及临床意义感染乙型肝炎病毒的患者易罹患肝癌,有学者统计发现,慢性乙型肝炎及慢性乙肝后肝硬化患者罹患肝癌的几率是正常人的9-10倍。80%以上的原发性肝癌患者有乙型肝炎病毒感染,原发性肝癌(HCC)是肝脏的恶性肿瘤,在所有的恶性肿瘤中死亡率高达第5位,其五年生存率不足5%,这些数据表明,了解HCC的发病过程,进行早期诊断与风险评估对HCC患者非常重要,但是目前尚缺乏非常有效的早期预测手段及监测方法。与肿瘤相关的增高的巨噬细胞被认为在肿瘤的病因及不良预后中扮演了重要角色,其中最近引起人们广泛兴趣的是,巨噬细胞的M2分型副群具有抗炎的作用,而抗炎因子CD163是M2副群的特异性标记,且为巨噬细胞活化的标记物,它的高表达可促进肿瘤的血管生成,纤维组织细胞重组,影响组织重建过程,在某些肿瘤的病理过程及在急慢性肝脏炎症疾病中起着重要作用。其在大量炎症性疾病及肿瘤性疾病中的广泛发现,使其有望成为近年来非常有效且易于监测的临床指标。而且在前一部分试验中,通过对ACHBLF患者中外周血及血浆中CD163与sCD163表达水平的检测,我们明确了在急性炎症反应过程中CD163及sCD163的表达与临床预后的关系。在本实验中,我们选取了HCC患者作为研究对象,明确CD163及sCD163在HCC患者中的表达,明确其在HCC发病过程中的重要作用,了解其与临床指标及预后的联系,寻找新的发病机理及治疗方向。目的：探讨HCC患者中外周血单个核细胞CD163及血浆中sCD163的表达,可明确其在HCC疾病过程中扮演的角色及临床意义,为临床治疗HCC寻找监测因子,探寻新的发病机理及治疗方向。方法： ELISA方法检测HCC患者、LC患者、CHB患者及HCs血浆中sCD163的表达水平；流式细胞术检测HCC患者、LC患者、CHB患者及HCs外周血单个核细胞CD163的阳性率和CD163平均荧光强度；应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测量HCC患者、LC患者、CHB患者及HCs组外周血单个核细胞中CD163mRNA的表达。结果： 1、外周血CD163阳性的单个核细胞比率在HCC患者中明显升高,组间有着显著性差异；CD163免疫荧光强度组间有显著性差异。 2、HCC患者中,CD163mRNA表达明显升高,组间具有显著性差异。 3、血浆中sCD163浓度在HCC患者中明显升高,组间具有显著性差异。 4、外周血中表达CD163的单个核细胞比率在LC患者中要明显高于HCs,具有显著性差异。 5、CD163mRNA在LC患者中的表达要高于HCs,组间具有显著性差异。 6、血浆sCD163表达在LC、CHB患者中明显升高,高于HCs,LC患者血浆sCD163升高幅度远远大于其在其CHB患者中升高幅度,具有显著性差异。 7、血浆sCD163表达水平与HCC患者的AFP、HBV-DNA、HBeAg无明显相关。 8、根据意大利CLIP评分分析,sCD163浓度与评分之间不存在明显相关性,TNM分期,Ⅲ期存在远处转移及Child C级的HCC患者的sCD163浓度要高于无远处转移Ⅰ、Ⅱ期患者,但是无显著性差异。结论：作为在巨噬细胞表面特异表达的CD163在HCC、LC患者发病过程中起重要作用,本研究提示CD163与sCD163都可以作为HCC及LC患者有用的标志物,其中sCD163检测更为简单直接,组间差异更为明显,与疾病的严重程度明显相关。但是sCD163与临床指标在HCC患者中均无明确相关,与患者预后的联系仍需进一步实验证实。中文摘要第三部分CD163综述 CD163结构及表达形式单核细胞和巨噬细胞在人类免疫系统中发挥着重要作用。巨噬细胞可分为M1型亚群和M2型亚群,两种细胞分别有促炎和抗炎的作用。CD163是在已知的M2型巨噬细胞表面特异性表达的,属于清道夫受体半胱氨酸富集结构域家族B。它是一个有着130kD重量的Ⅰ型蛋白,共有5种同源异构体,结构中含有9个清道夫受体半胱氨酸富集结构域。CD13在体内共有两种存在形式：一种是以跨膜大分子的形式存在于单核巨噬细胞上；另一种是存在于血浆或其它组织液内,具有可溶性,即sCDl63。 CD163的作用 CD163可以特异地识别血红蛋白：结合珠蛋白复合体,是体内血红蛋白的特异性清道夫受体。通过清除游离的血红蛋白,CD163可起到调节人体免疫的作用。CD163还可识别肿瘤坏死因子样凋亡弱诱导因子(TWEAK),并与其特异性结合,发挥抗炎作用,担当着革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌监控器的角色；在炎症反应刺激下,CD163可以和自己的配体结合,转导信号,促进单核细胞与上皮细胞的黏附,诱导炎性介质IL-10等炎症因子的释放。 CD163与各种疾病的关系 CD163及sCD163与免疫系统关系密切。大量的临床及实验室研究证实,CD163及sCD163与各种炎症性、肿瘤性、心脑血管疾病密切相关。在严重烧伤、急性肝衰竭等严重炎性疾病时,CD163明显升高,与预后有明显相关;在肝癌、淋巴瘤等恶性肿瘤中,亦可见CD163的明显升高,在淋巴结转移及治疗反应不佳的病人中尤为明显,提示CD163在肿瘤患者预后监测中的重要作用。糖尿病、高血脂、冠状动脉粥样硬化性心脏病等疾病中,CD163及sCD163均已被明确证实与疾病预后明显相关。 CD163及sCD163在抗炎、促肿瘤方面的广阔前景,使其成为人们在未来研究的热门生物靶点,并已取得了初步成效。
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【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R512.62;R575.3;R735.7

【参考文献】