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PTEN基因沉默骨髓间充质干细胞移植治疗急性心肌梗死

发布时间:2019-02-11 17:57
【摘要】:背景:骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死是近年来的研究热点,但是心肌梗死区域的缺血缺氧微环境和早期炎症反应不利于移植细胞的存活,影响治疗效果。目的:探讨PTEN基因沉默骨髓间充质干细胞治疗急性心肌梗死的效果。方法:(1)SD大鼠骨髓间充质干细胞随机分为3组,空白对照组不进行任何处理,阴性对照组用Lipofectamin2000转染无意义的NCsiR NA,RNAi组用Lipofectamin2000转染PTEN基因特异的siR NA。采用MTT法描绘细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期;(2)取30只SD大鼠建立心肌梗死模型,随机分为3组,每组10只,分别为空白对照组、阴性对照组、RNAi组。建模6 h后,使用微量注射器和立体定位仪在左心室前壁梗死区中心注射相应的骨髓间充质干细胞,治疗后4周进行超声心功能检测,采用荧光显微镜观察细胞的存活和增殖情况。结果与结论:(1)RNAi组骨髓间充质干细胞在培养各时间点的吸光度值均显著大于空白对照组和阴性对照组;(2)RNAi组S+G2期细胞占总数的比例显著大于空白对照组和阴性对照组(P0.05);(3)RNAi组大鼠心肌组织中骨髓间充质细胞数量显著多于空白对照组和阴性对照组(P0.05);(4)治疗4周,RNAi组的左心室射血分数、左心室短轴缩短率显著小于空白对照组和阴性对照组(P0.05);(5)体外实验表明PTEN基因沉默能有效地促进骨髓间充质干细胞的增殖,抑制细胞凋亡;(6)体内实验表明PTEN基因沉默的骨髓间充质干细胞在心肌梗死区域更易存活和扩增,心功能改善明显。
[Abstract]:Background: bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for myocardial infarction is a hot topic in recent years, but the ischemic and hypoxic microenvironment and early inflammatory reaction in myocardial infarction area are not conducive to the survival of transplanted cells and affect the therapeutic effect. Objective: to investigate the effect of PTEN gene silencing bone marrow mesenchymal stem cells in the treatment of acute myocardial infarction. Methods: (1) Bone marrow mesenchymal stem cells of SD rats were randomly divided into three groups: blank control group without any treatment, negative control group with Lipofectamin2000 transfection of meaningless NCsiR NA,RNAi group with Lipofectamin2000 transfection of PTEN gene specific siR NA. MTT method was used to depict cell growth curve and flow cytometry was used to detect cell cycle. (2) 30 SD rats were selected to establish myocardial infarction model and were randomly divided into 3 groups: blank control group, negative control group and RNAi group. After 6 hours of modeling, bone marrow mesenchymal stem cells were injected into the center of left ventricular anterior wall infarction area with microinjector and stereotactic locator. Echocardiographic cardiac function was measured 4 weeks after treatment. The survival and proliferation of cells were observed by fluorescence microscope. Results and conclusion: (1) the absorbance of bone marrow mesenchymal stem cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group at all time points. (2) the proportion of S G2 phase cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group (P0.05). (3) the number of bone marrow mesenchymal cells in RNAi group was significantly higher than that in blank control group and negative control group (P0.05). (4) after 4 weeks of treatment, left ventricular ejection fraction and shortening rate of left ventricular short axis in RNAi group were significantly lower than those in blank control group and negative control group (P0.05). (5) in vitro experiments showed that PTEN gene silencing could effectively promote the proliferation of bone marrow mesenchymal stem cells and inhibit the apoptosis of bone marrow mesenchymal stem cells. (6) in vivo experiments showed that PTEN gene silencing bone marrow mesenchymal stem cells were easier to survive and expand in myocardial infarction area, and the heart function was improved obviously.
【作者单位】: 河南大学淮河医院老年病科;
【分类号】:R542.22

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本文编号:2419970

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