AQP5在手汗症合并腋窝多汗患者腋窝汗腺的表达定位及人汗腺细胞体外模型的实验研究

发布时间：2019-10-28 23:34

【摘要】：目的 检测多汗症患者腋窝汗腺水通道蛋白5（aquaporin5，AQP5）的表达与定位，并通过建立人体汗腺细胞体外模型的实验研究，探讨其与多汗症发病机制的关系。 方法 收集手汗症合并腋窝中重度多汗患者（实验组）及非多汗患者（对照组）腋窝皮肤及血清标本，HE染色及透射电镜观察两组间形态学差异，并电镜下计数汗腺细胞分泌颗粒，免疫组化、荧光定量PCR及Western-blot法检测AQP5表达。 酶消化法培养两组汗腺细胞，通过细胞免疫化学法鉴定细胞，，并比较两组细胞生长趋势及AP5表达；Elisa法检测两组血清乙酰胆碱浓度，并按照测得两组浓度配制培养液进行细胞培养，通过免疫荧光法及Western-blot法检测汗腺细胞AQP5表达。 结果 两组间在病理形态学及超微结构上未见明显差异；实验组细胞分泌颗粒显著高于对照组，且AQP5mRNA及蛋白表达量显著高于对照组；培养的汗腺细胞抗-CK7,抗-CK19染色阳性，抗-Actin染色阴性，两组细胞生长趋势接近；实验组AQP5mRNA表达量高于对照组（P0.05），而蛋白表达无明显差异（P0.05）； 实验组外周血乙酰胆碱浓度高于对照组（P0.05）；按照测得浓度配制培养液培养汗腺细胞，6h后高浓度培养液汗腺细胞AQP5表达强度明显高于低浓度组（P0.05）。 结论 手汗症合并腋窝多汗者腋窝汗腺与非多汗症者相比在形态学上无差异，但分泌颗粒增多，AQP5mRNA及蛋白表达增强，且外周血乙酰胆碱浓度升高，表明神经递质（乙酰胆碱）过度释放及AQP5的过表达可能同多汗症发病机制相关； 体外培养腋窝多汗者汗腺细胞AQP5mRNA表达水平高于非多汗者，而蛋白表达无明显差异，乙酰胆碱刺激后两组体外培养的细胞AQP5表达均明显增强，且高浓度组表达高于低浓度组，其提示手汗症合并腋窝多汗者汗腺AQP5蛋白表达增强可能与神经体液调节有关；
【图文】：

31汗腺在形态结构上未见明显差异（见图3.1,3.2）。图3.1 对照组汗腺形态结构（HE×400）图3.2 实验组汗腺形态结构（HE×400）图注：黑色箭头方向指向汗腺腺管3.2.2 汗腺超微结构检测结果透射电镜观察可见，对照组与实验组汗腺细胞核呈椭圆形,可见胞质内粗面内质网、高尔基复合体、线粒体等细胞器，靠汗腺管腔位置附近可见高密度

汗腺在形态结构上未见明显差异（见图3.1,3.2）。图3.1 对照组汗腺形态结构（HE×400）图3.2 实验组汗腺形态结构（HE×400）图注：黑色箭头方向指向汗腺腺管3.2.2 汗腺超微结构检测结果透射电镜观察可见，对照组与实验组汗腺细胞核呈椭圆形,可见胞质内粗面内质网、高尔基复合体、线粒体等细胞器，靠汗腺管腔位置附近可见高密度
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R655;R-332

【参考文献】

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1 方利君,付小兵,孙同柱,李建福,程飚,杨银辉,王玉新,王通;在体诱导骨髓间充质干细胞分化为表皮细胞的初步观察[J];中华创伤杂志;2003年04期

2 涂远荣;李旭;林敏;赖繁彩;陈剑锋;叶建刚;代祖建;;手汗症患者胸交感神经超微结构观察[J];中华实验外科杂志;2006年07期

3 涂远荣;叶建刚;李旭;林敏;赖繁彩;陈剑锋;;手汗症患者胸交感神经节乙酰胆碱受体α7亚单位的表达与临床意义[J];中华实验外科杂志;2006年11期

4 代祖建;涂远荣;李旭;林敏;赖繁彩;陈剑锋;;手汗症患者胸交感神经节胆碱乙酰转移酶、血管活性肠肽的表达及意义[J];中华实验外科杂志;2007年08期

5 杨R

本文编号：2553269