S100A8和S100A9在脑缺血再灌注损伤中的表达及其意义

发布时间：2020-03-06 08:43

【摘要】：目的: 通过对TLR4基因突变型（TLR4-/-）C3H/HeJ小鼠和野生型C3H/HeN小鼠行大脑中动脉栓塞术，建立脑缺血再灌注损伤模型，观察小鼠神经功能学的变化，，并通过检测小鼠脑梗死体积、缺血再灌注后脑细胞形态变化，以及检测在蛋白水平和mRNA水平S100A8和S100A9的表达变化，探讨S100A8、S100A9和TLR4在脑缺血再灌注损伤中的作用及可能机制，从而为从炎症介质途径寻求预防脑缺血再灌注损伤提供新的切入点。方法: 选用三月龄SPF级突变型C3H/HeJ小鼠30只，野生型C3H/HeN小鼠30只，体重20-25克，均饲养于华中科技大学同济医学院实验动物中心，标准饲料喂养，自由饮水，室温保持在(24±2)℃，相对湿度60±5%，光线按正常昼夜节律调节，将动物随机分为野生型正常组（C3H/HeN Control, n=12），突变型正常组(C3H/HeJ Control，n=12)，野生型模型组(C3H/HeN Model，n=18)以及突变型模型组（C3H/HeJ Model，n=18），评价模型组神经功能缺损评分、脑梗死体积。取脑缺血再灌注24小时的脑片行免疫组化检测S100A8和S100A9的蛋白表达，以及应用RT-PCR检测S100A8和S100A9在mRNA水平上的相对表达量。结果: 实验发现C3H/HeN神经功能学评分明显高于C3H/HeJ组（P0.01）；再灌注24小时后，C3H/HeJ组脑梗死体积明显小于C3H/HeN组（P0.01），HE染色发现C3H/HeN模型组神经细胞排列紊乱，部分细胞空泡变，细胞核大小不一，部分浓缩凝固，C3H/HeJ模型组神经细胞排列较野生型模型组整齐，水肿、变性坏死明显减轻；免疫荧光检测发现C3H/HeN正常组和C3H/HeJ正常组S100A8和S100A9阳性蛋白表达细胞数目较少，各组差异无明显统计学意义，但是再灌注24h后，各模型组中S100A8和S100A9阳性蛋白表达显著增强（P0.01），且C3H/HeN模型组较C3H/HeJ模型组S100A8和S100A9表达阳性细胞数目增加更为明显（P0.01）；RT-PCR分析发现各模型组S100A9和S100A8mRNA表达量较正常组均显著增加（P0.01），但是C3H/HeJ模型组S100A9和S100A8mRNA表达较C3H/HeN模型组有所减少（P0.05）。结论: S100A8和S100A9参与了脑缺血再灌注损伤的早期过程，且很有可能作为内源性TLR4配体通过活化TLR4信号通路来介导早期脑I/R损伤。
【学位授予单位】：华中科技大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R651.15

【参考文献】