胰岛素通过PI3K/Akt信号通路调控急性肺损伤ENaC介导的肺泡液体清除的机制研究

发布时间：2020-12-14 05:32

　　目的通过建立非高血糖的急性肺损伤（ALI）动物模型，观察胰岛素对肺泡液体清除（AFC）和上皮钠离子通道（ENaC）表达的调控，探讨胰岛素在ALI中的作用；同时通过体外培养肺泡上皮细胞A549，进一步明确在胰岛素作用下调控ENaC可能的信号通路及作用机制，为其今后的临床应用提供理论依据及新思路。方法（1）成年健康的SD大鼠经腹腔注射戊巴比妥（50mg/kg）麻醉后，行颈静脉置管。①胰岛素组（LPS+Insulin）：通过颈静脉给予脂多糖（LPS）（5mg/kg），在给予LPS前16h，微量泵入胰岛素（0.1U/kg/h）；②渥曼青霉素（PI3K阻断剂）组（LPS+Insulin+Wortmannin）：通过颈静脉给予LPS（5mg/kg），在给予LPS前16h，微量泵入胰岛素（0.1U/kg/h），同时在给予LPS前90min，LPS后90min和360min分别静脉给予渥曼青霉素（0.06mg/kg）。③脂多糖（LPS）组：通过颈静脉给予LPS（5mg/kg），在给予LPS前16h，微量泵入等量生理盐水；④对照组（Control）：通过颈静脉给予等量生理盐水，并在颈静脉注射前16h微量... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：106 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

ARDS时肺泡腔内水肿液聚集示意图

介导的肺水肿清除机制及治疗 ALI/ARDS 提供了理论依据。综上，本实验试图探究胰岛素是否通过 PI3K/Akt 信号途径参与调控 ENaC基 α、β、γ 的表达，从而影响肺泡上皮钠离子转运及肺水肿液的清除；并探讨 PI3K/Akt 信号通路调控 ENaC 表达的可能机制，有助于更全面地阐明在治疗 ALI/ARDS 中的作用机理，为改善疾病预后和临床治疗奠定重要的础，具有极大的临床指导意义。

胶成像系统 美国 Bio-Rad 公司 Gel Doc20003 方法.1 动物模型制备1) SD 大鼠称重后，用 3%戊巴比妥（50mg/kg）经腹腔注射麻醉。2) 大鼠麻醉后将其仰卧于解剖板上，用橡皮筋固定四肢及头部，尽向后伸展充分暴露颈部，备皮，常规消毒、铺巾，术者戴无菌3) 切开大鼠皮肤及皮下组织，用血管钳钝性逐层分离组织直至颈静用丝线结扎颈静脉远心端。4) 在血管上剪一小口，然后将用肝素处理后的腰麻管沿切口方向置约 0.5cm 后结扎固定，另一端连接微量泵。5) 胰岛素以 0.1U/kg/h 剂量微量泵入，对照组泵入等量生理盐水。


本文编号：2915909