IL-10-hAMSCs对小鼠创面愈合相关因子的影响研究

发布时间：2020-12-16 23:04

　　目的:应用携带有C57BL/6小鼠白细胞介素-10（IL-10）基因的慢病毒转染人羊膜间充质干细胞（human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs）,构建IL-10修饰的hAMSCs（IL-10-hAMSCs）,初步探讨IL-10-hAMSCs对小鼠皮肤创面愈合相关因子的调控作用中hAMSCs与IL-10同时发挥的作用。方法:1.无菌条件下提取30岁以下健康产妇剖宫产胎盘羊膜,使用胰蛋白酶+胶原酶二步法体外分离提取出hAMSCs,无菌清洁孵箱中培养,提纯传代至3-5代后予以冻存后备用。2.由重庆绿泽森生物有限公司合成C57B6/L小鼠IL-10基因,使用慢病毒作为基因载体并携带GFP荧光蛋白,对hAMSCs进行转染以得到IL-10-hAMSCs,使用荧光倒置显微镜镜下观察绿色荧光表达情况以评估转染效率。3.取8周龄的C57B6/L小鼠120只图表法随机分别为:（1）对照组,（2）hAMSCs组、（3）IL-10-hAMSCs组、每组40只。浓度4%水合氯醛溶液行麻醉后沿背部脊柱等距离对称制作全层皮肤缺损创面模型（1.0×1.0cm）,对照组小鼠... 

【文章来源】：遵义医科大学贵州省

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1AhAMSCs原代接种24h后细胞开始出现贴壁（100×）；图1BhAMSCs原代接种72h后（100×）；图

图 2图 2A：hAMSCs 转染 白光（200×）； 图 2B：hAMSCs 转染 荧光（200×）2.3 C57BL/6 小鼠背部皮肤全层缺损创面的制作及分组：将麻醉后剃毛的小鼠使用中性笔沿脊柱划线后对称设计 1.0cm×1.0cm 的全层皮肤缺损创面，使用显微组织剪或眼科剪制作创面。建模方法如下：ABCI

表 1 小鼠分组及干预方式分别于建模后第 1、3、7、14 天取材，拍照结果显示 IL-10-hAMSCs 愈合速度相比 hAMSCs 快，愈合质量最佳，对照组创面愈合速度最慢，瘢明显。组别 干预方式 注射量 样对照组 PBS 200μl hAMSCs 组 hAMSCs 200μl (5×105/100μl) IL-10-hAMSCs 组 IL-10-hAMSCs 200μl (5×105/100μl)


本文编号：2920939