脑室灌注促红细胞生成素治疗颅脑创伤大鼠的实验研究

发布时间：2021-02-20 20:57

　　目的颅脑创伤已经成为中青年获得性脑损伤的主要形式,对于颅脑创伤后的神经和认知功能障碍目前仍旧缺乏有效的干预手段。近年来的研究表明促红细胞生成素（EPO）和促红细胞生成素受体（EPOR）广泛的存在于中枢神经组织中,外源性EPO的神经保护作用已在多种中枢神经系统疾病实验动物模型中得到确认。但是EPO的作用机制仍未完全阐明,而且作为一种造血刺激激素,EPO血液系统的副作用往往限制了EPO的临床应用。CD133阳性细胞作为一种对于干祖细胞趋化迁移具有重要作用的细胞表面糖蛋白可能在创伤后的神经修复过程中起重要作用,可能在EPO的作用过程中扮演重要角色。本实验旨在探索颅内直接给予EPO的作用有效性,检测EPO脑室灌注对创伤组织内CD133阳性细胞的影响进而探索EPO的作用机制。实验一EP0脑室灌注改善创伤大鼠神经和认知功能方法为了检测EPO脑室注射对创伤后血管新生和神经功能的影响,本实验使用成年雄性Wistar大鼠40只,建立大鼠液压打击颅脑创伤模型,并进行侧脑室微渗透压泵套管植入。将试验大鼠随机分为假手术对照组（Sham）、TBI组（TBI）、TBI+EPO腹腔注射组（EPO IP）、TBI+生... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：95 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
縮略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、EPO脑室灌注改善创伤大鼠神经和认知功能
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验设备和材料
        1.1.2 实验动物和分组
        1.1.3 TBI动物模型制备
        1.1.4 渗透压泵套管脑室植入和准确性的确定
        1.1.5 神经功能评价
        1.1.6 水迷宫试验
        1.1.7 血红蛋白浓度和红细胞压积
        1.1.8 大鼠心脏灌注,脑组织标本固定、切片和苏木素尹红染色
        1.1.9 大鼠损伤区面积计算
        1.1.10 免疫组化染色检测血管密度
        1.1.11 免疫荧光brdu染色检测细胞增值
        1.1.12 统计分析
    1.2 结果
        1.2.1 EPO治疗对试验大鼠神经功能评分的影响
        1.2.2 EPO治疗对试验大鼠错步试验的影响
        1.2.3 EPO治疗对试验大鼠水迷宫试验的影响
        1.2.4 EPO治疗对试验大鼠脑组织组织病理学改变的影响
        1.2.5 EPO脑室灌注对试验大鼠脑组织细胞增殖的影响
        1.2.6 EPO脑室灌注对试验大鼠脑组织血管新生的影响
        1.2.7 EPO脑室灌注和腹腔注射对试验大鼠红细胞压积和血红蛋白浓度的影响
    1.3 讨论
        1.3.1 颅脑创伤后的病理生理改变
        1.3.2 颅脑创伤后的神经功能障碍的治疗
        1.3.3 EPO的神经保护作用
        1.3.4 EPO脑室注射对细胞增殖的影响
        1.3.5 EPO脑室注射改善TBI大鼠的认知功能
        1.3.6 EPO脑室注射改善TBI大鼠的神经功能
        1.3.7 EPO脑室注射促进创伤后的血管新生
        1.3.8 EPO脑室注射不影响血红蛋白浓度和红细胞压积
    1.4 小结
二、EPO脑室注射增加创伤区CD133抗原,VEGF和SDF-1表达
    2.1 对象和方法
        2.1.1 试验动物及分组
        2.1.2 TBI动物模型
        2.1.3 立体定向植入渗透压泵套管
        2.1.4 免疫组化染色检测创伤脑组织CD133+细胞
        2.1.5 酶联免疫吸附反应（ELISA）检测创伤皮层VEGF和SDF-1表达
        2.1.6 RT-PCR分析检测VEGF和SDF-1转录水平
        2.1.7 统计分析
    2.2 结果
        2.2.1 实验性大鼠颅脑创伤
        2.2.2 颅脑创伤诱导CD133+细胞在创伤区的侵润
        2.2.3 EPO脑室灌注增加创伤区CD133+细胞
        2.2.4 CD133+细胞表达EPO受体、VEGF和SDF-1
        2.2.5 EPO脑室灌注增加创伤区VEGF和SDF-1的浓度
        2.2.6 EPO脑室灌注增加创伤区VEGF和SDF-1的转录水平
    2.3 讨论
        2.3.1 颅脑创伤诱导CD133+细胞在受损脑组织的侵润
        2.3.2 EPO增加了CD133+细胞在创伤区的侵润
        2.3.3 CD133+细胞表达EPO受体、VEGF和SDF-1
        2.3.4 EPO脑室注射增加创伤区VEGF和SDF-1的表达
    2.4 小结
全文结论
论文创新点
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 促红素治疗颅脑创伤的给药方式选择
    综述参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Erythropoietin Receptor Positive Circulating Progenitor Cells and Endothelial Progenitor Cells in Patients with Different Stages of Diabetic Retinopathy[J]. Liu-mei Hu1, Xia Lei2, 3, Bo Ma4, Yu Zhang5, Yan Yan6, Ya-lan Wu3, Ge-zhi Xu4, Wen Ye5, Ling Wang6, Guo-xu Xu7 , Guo-tong Xu2, 3*, and Wei-ye Li1, 2, 3, 8* 1Department of Ophthalmology, Peking Union Medical College Hospital, Chinese Academy of Medical Sciences & Peking Union Medical College, Beijing 100730, China 2Tongji Eye Institute and Department of Regenerative Medicine, Tongji University School of Medicine, Shanghai 200092, China 3Laboratory of Clinical Visual Sciences, Institute of Health Sciences, Shanghai Institutes for Biological Sciences, Chinese Academy of Sciences & Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200025, China 4Department of Ophthalmology, Eye and ENT Hospital, Fudan University, Shanghai 200031, China 5Department of Ophthalmology, Huashan Hospital Affiliated to Fudan University, Shanghai 200040, China 6Department of Ophthalmology, Ruijin Hospital Affiliated to Shanghai Jiao Tong University School of Medicine, Shanghai 200025, China 7Department of Ophthalmology, Second Affiliated Hospital of Soochow University, Suzhou, Jiangsu 215004, China 8Department of Ophthalmology, Drexel University College of Medicine, Philadelphia, PA 19107, USA.  Chinese Medical Sciences Journal. 2011(02)



本文编号：3043336