CM-Dil标记人脐带间充质干细胞治疗大鼠急性肝衰竭的实验研究

发布时间：2021-04-15 19:43

　　研究背景:急性肝衰竭（acute liver failure,ALF）是多种因素引起的严重肝脏损伤,伴有严重肝功能障碍或失代偿,从而导致凝血功能障碍、黄疸、肝性脑病、腹水等的临床症候群。目前,急性肝衰竭的治疗手段主要包括内科药物治疗、人工肝、肝移植等;肝移植作为治疗该病最有效的方法,因供体少、风险高、同时存在免疫排斥反应及并发症等问题难以广泛开展,因此寻求新疗法成为肝衰竭研究重点。间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）作为治疗肝衰竭的新疗法被提出,但归巢于损伤肝脏的细胞数目过少;本团队前期研究发现急性肝衰竭大鼠肝脏中HGF浓度最高,HGF为c-Met受体的配体,过表达c-Met的骨髓MSCs可靶向归巢于受损肝脏,促进损伤肝脏的修复。但骨穿得到MSCs的数量有限及其增殖分化潜能随年龄的增长而下降,同时患者存在基础疾病等原因限制自体骨髓MSCs的广泛应用。相较于骨髓MSCs,脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUC-MSCs）具有更强的增殖和分化潜能,且不受自身基础疾病影响。此外有研究表... 

【文章来源】：南京医科大学江苏省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

AhUC-MSCs的培养

结果1、 人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）的培养与鉴定P3代 hUC-MSCs 呈长梭形或旋涡状生长，细胞排列紧密，形态均一（图1A）。流式细胞仪检测 hUC-MSCs 表面标志，高表达间质细胞表面标志：CD44、CD90和CD105表达均高于95%（分别为99.7%、97.7%和96.4%），低表达造血系标志及内皮标志：CD45、CD34、CD31，其表达均低于5%（图1B），上述结果符合间充质干细胞特性[32]。且研究表明 hUC-MSCs 不表达协同刺激分子 CD80、CD86 和CD40、人白细胞抗原 HLA-DR，HLA-G，HLA-DP，HLA-DQ 等[32]。图1A hUC-MSCs 的培养

2、 治疗后三组大鼠生存率变化P5代 hUC-MSCs 治疗组、P10代 hUC-MSCs 治疗组和对照组三组急性肝衰竭大鼠的生存率分别为62.5%、37.5%和0%。图2中对照组在第二天与第三天死亡率较高，且造模五天后存活率为0%。P10代 hUC-MSCs 治疗组在造模后第二天，第三天及第四天大鼠均有死亡，观察一周后仅存活3只 SD 大鼠，生存率为37.5%；P5代 hUC-MSCs 治疗组在第二天及第四天各死亡一只，观察一周后存活5只 SD 大鼠，生存率高达62.5%，结果提示 hUC-MSCs 治疗可提高肝衰竭大鼠生存率，且 P5代 hUC-MSCs 治疗组大鼠生存率与 P10代 hUC-MSCs 治疗组大鼠生存率之间存在统计学意义(P<0.05)。图 2 三组急性肝衰竭大鼠经治疗后的生存率3、治疗后大鼠肝功变化大鼠在造模24h,48h,72h 后肝功变化见表1；统计分析发现（图3）


本文编号：3139975