FOXO1对急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠通道的调控作用及其机制

发布时间：2021-04-23 14:00

　　目的:探讨叉头框蛋白O1 （FOXO1）对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤小鼠肺泡上皮钠通道（ENaC）的调控作用,并阐明其可能的作用机制。方法 :20只C57BL/6J小鼠随机分为对照组和LPS组,每组10只。经相应处理后分别留取标本,HE染色观察2组小鼠肺组织病理形态表现,RT-PCR和Western blotting法检测2组小鼠肺组织中α亚基ΕΝαC （αENaC） mRNA表达水平及磷酸化FOXO1 （pFOXO1）表达水平。培养肺泡上皮A549细胞,分别进行基因干预,使A549细胞过表达或沉默FOXO1基因,RT-PCR法检测αENaC mRNA表达水平。A549细胞分为对照组、胰岛素组、胰岛素+PI3K抑制剂组和胰岛素+AKT抑制剂组,分别干预后收集细胞,Western blotting法检测各组A549细胞中pFOXO1 （Ser256）蛋白表达水平,RT-PCR法检测各组A549细胞中αENaC mRNA表达水平,免疫荧光法检测FOXO1在细胞中的定位情况。结果:与对照组比较,LPS组小鼠肺组织病理评分明显升高（P<0.05）,肺组织中pFOXO1 （Ser25... 

【文章来源】：吉林大学学报(医学版). 2020,46(06)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物、细胞、主要试剂和仪器
    1.2 动物分组和干预方式
    1.3 HE染色观察对照组和LPS组小鼠肺损伤评分
    1.4 FOXO1过表达重组腺病毒载体系统的构建
    1.5 细胞分组和干预
    1.6 RT-PCR法检测2组小鼠肺组织和细胞中αENaC mRNA表达水平
    1.7 Western blotting法检测各组小鼠肺组织和细
    1.8 免疫荧光法检测各组A549细胞中FOXO1的胞内定位情况
    1.9 统计学分析
2 结果
    2.1 对照组和LPS组小鼠肺组织损伤程度和损伤评分
    2.2对照组和LPS组小鼠肺组织中αENaC、FOXO1和pFOXO1蛋白表达水平
    2.3 FOXO1基因过表达后各组A549细胞中FOXO1和
    2.4 FOXO1基因沉默后各组A549细胞中FOXO1蛋白和αENa C m RNA表达水平
    2.5 各组A549细胞中FOXO1和p FOXO1蛋白及αENa C m RNA表达水平
    2.6 各组A549细胞中FOXO1的胞内定位情况
3 讨论



本文编号：3155459