外源性硫化氢对大鼠皮肤成纤维细胞胱硫醚-γ-裂解酶/硫化氢

发布时间：2021-05-06 15:57

　　目的：研究大鼠正常皮肤体外培养的成纤维细胞在加入外源性硫化氢和胱硫醚-γ-裂解酶抑制剂后，细胞培养后上清液硫化氢含量及其生成酶胱硫醚-γ-裂解酶mRNA表达水平的变化规律，探讨大鼠皮肤成纤维细胞是否存在硫化氢/硫醚-γ-裂解酶体系。方法：大鼠正常皮肤成纤维细胞为研究对象，按照正常的成纤维细胞培养条件进行培养和传代，取第4代的成纤维细胞，随机分为空白对照组、实验对照组、NaHS组和PPG组。在细胞培养板上每组设立3个副孔，每孔置入相同浓度和数量的成纤维细胞。细胞培养48小时后，进行细胞同步化并加入不同浓度的干预剂，继续培养24h收集细胞上清液及细胞。用敏感硫电极测定细胞上清液H2S含量，用Trizol法提取成纤维细胞总RNA并鉴定后RT-PCR测定CSE mRNA基因表达水平。结果：NaHS组细胞上清液H2S含量较空白对照组、实验对照组增高（P<0.05），PPG组细胞上清液H2S含量较空白对照组、实验对照组降低（P<0.05），空白对照组、实验对照组、NaHS组（N1,N2,N3）、PPG组（P1,P2,P3）各组间对比大鼠正常皮肤成纤维细胞CSE mRNA表达水平均无显著... 

【文章来源】：青海大学青海省 211工程院校

【文章页数】：38 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 实验条件
    2.2 主要试剂
    2.3 主要仪器
    2.4 主要溶液配置
    2.5 测定指标及方法
    2.6 成纤维细胞培养
        2.6.1 细胞培养、换液
        2.6.2 细胞传代
        2.6.3 细胞计数
    2.7 实验分组及技术路线图
    2.8 敏感硫电极测上清液 H2S 浓度
        2.8.1 细胞处理
        2.8.2 上清液收集及 H2S 浓度测定
    2.9 RT-PCR 测细胞 CSE MRNA 表达水平
        2.9.1 总 RNA 的提取
        2.9.2 RNA 的鉴定
        2.9.3 cDNA 制备和 PCR 扩增反应
    2.10 统计方法
第3章 结果
    3.1 上清液硫化氢浓度
    3.2 RT-PCR 测 CSE MRNA
第4章 讨论
第5章 结论
第6章 参考文献
致谢
附录
    英文缩略词
    实验仪器
    实验试剂
    实验操作图片
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]外源性硫化氢对大鼠深Ⅱ°烧伤创面巨噬细胞数量和微血管数量的影响[J]. 张海瑞,李毅,王洪瑾.  青海医学院学报. 2013(03)
[2]硫化氢对烧伤大鼠肠道组织干扰素-γ、肿瘤坏死因子-α含量的影响[J]. 孙超,李毅,王洪瑾.  中华损伤与修复杂志(电子版). 2013(02)
[3]气体信号分子H2S体系同NO、CO体系之间的关系[J]. 李祥,关巍.  中华肺部疾病杂志(电子版). 2012(02)
[4]硫化氢对大鼠烧伤后炎症反应的影响[J]. 未培轩,李毅,王洪瑾,曾皓.  中华损伤与修复杂志(电子版). 2012(01)
[5]硫化氢与氧化应激[J]. 王洪瑾,李毅.  医学研究生学报. 2011(04)
[6]硫化氢对严重烧伤大鼠重要脏器的影响[J]. 李毅,王洪瑾,宋学芳,杨惠莲.  中华烧伤杂志. 2011 (01)
[7]硫化氢对严重烧伤早期大鼠血清TNF-α及MDA含量变化的干预作用研究[J]. 吴贞天,李毅.  中华损伤与修复杂志(电子版). 2010(04)
[8]低O2高CO2性肺动脉高压时大鼠肺组织硫化氢体系的变化及川芎嗪的干预[J]. 贾旭广,石璐,林丽娜,汪洋,许益笑,王万铁.  中国病理生理杂志. 2010(03)
[9]内源性气体信号分子H2S研究进展[J]. 周辉,高洪,严玉霖,周铭涛,肖鹏.  动物医学进展. 2009(06)
[10]中医药干预全身炎症反应综合征研究概况[J]. 李越华.  辽宁中医杂志. 2009(03)



本文编号：3172208