自噬对脓毒症小鼠中性粒细胞PD-L1调控的机制研究

发布时间：2021-05-13 13:09

　　【研究目的】研究脓毒症时中性粒细胞自噬的改变对小鼠中性粒细胞程序性死亡配体-1（PD-L1）的调控作用。【研究方法】采用加权基因共表达网络分析方法对Affymetrix Mouse Transcriptome Array1.0基因芯片检测的差异基因进行分析,根据相异系数构建共表达模块,对共表达模块进行GO term和KEGG pathway富集分析,寻找与脓毒症时中性粒细胞的功能改变密切相关的表型。体内实验采用小鼠盲肠结扎穿孔实验（CLP）来模拟脓毒症小鼠模型,在CLP术后4天留取4个脏器（肺脏、肝脏、脾脏、胰腺）进行免疫组化染色,观察各脏器中性粒细胞的浸润情况;同时通过免疫荧光染色检测术后1天和4天CLP小鼠肺脏中性粒细胞PD-L1和自噬标志物LC3的表达水平。在自噬激动剂雷帕霉素（RAPA）的干预下,检测术后1天和4天CLP小鼠肺脏中性粒细胞PD-L1和自噬标志物LC3的表达水平。体外实验采用脂多糖（LPS）刺激小鼠骨髓中性粒细胞模型,并且用自噬激动剂RAPA和自噬抑制剂巴佛洛霉素A1（Baf）进行干预刺激,在基因和蛋白层面分别检测PD-L1和LC3的表达水平。与此同时,采用流式细... 

【文章来源】：江苏大学江苏省

【文章页数】：72 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
前言
第一部分 基于加权基因共表达网络分析研究脓毒症中性粒细胞关键功能的变化
    第一节 小鼠骨髓中性粒细胞的提取与鉴定
        1.引言
        2.实验材料
        3.实验方法
        4.实验结果
        5.讨论
        6.结论
    第二节 基因芯片与加权基因共表达分析的建立
        1.引言
        2.实验材料
        3.实验方法
        4.实验结果
        5.讨论
        6.结论
第二部分 自噬的改变对脓毒症时中性粒细胞功能的影响
    第一节 脓毒症对中性粒细胞PD-L1 表达水平的影响
        1.引言
        2.实验材料
        3.实验方法
        4.实验结果
        5.讨论
        6.结论
    第二节 自噬的改变对脓毒症时中性粒细胞PD-L1 表达水平及凋亡的影响
        1.引言
        2.实验材料
        3.实验方法
        4.实验结果
        5.讨论
        6.结论
总结
参考文献
综述 中性粒细胞自噬的研究进展
    参考文献
致谢
攻读硕士期间发表文章



本文编号：3184075