脑外伤后Salubrinal通过抑制内质网应激、自噬和凋亡发挥神经保护作用

发布时间：2021-09-13 18:06

　　目的:创伤性脑损伤（traumatic brain injury,TBI）,又称为脑外伤,是在外力的作用下引起的脑损伤,其病理过程相当复杂,严重的可以导致重度残疾甚至死亡。TBI可引起继发性脑损伤,包括内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）、凋亡和自噬等。尽管研究人员已经证明Salubrinal（p-e IF2α选择性磷酸酶抑制剂）可以改善小鼠TBI后神经功能缺损,但需对其神经保护机制进一步研究以确认其潜在临床前价值。本研究旨在探究TBI后Salubrinal治疗对小鼠神经损伤的保护作用及其可能机制。方法:用改良的自由落体装置建立ICR小鼠TBI模型。为了观察TBI后ERS相关蛋白的表达,小鼠分别于损伤后6h、1d、2d、3d、7d、10d和14d处死,术后第2天处死对照小鼠。TBI后2d,利用免疫荧光法观察CHOP在NVU组成细胞（包括神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、血管内皮细胞及周细胞）的共表达情况。为了控制手术造成的非特异性影响,假手术（sham）组动物仅开颅不损伤皮质。为了探究Salubrinal对TBI的影响,实验分组如下:vehic... 

【文章来源】：苏州大学江苏省 211工程院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实验的时间流程图

13脑外伤后Salubrinal通过抑制内质网应激、自噬和凋亡发挥神经保护作用第一部分图2.（A-D）CHOP与NeuN标记的神经元共定位。（E-H）CHOP与GFAP标记的星形胶质细胞的共定位。（I-L）CHOP与Iba-1标记的小胶质细胞共定位。（M-P）CHOP与CD31标记的血管内皮细胞共定位。（Q-T）CHOP与PDGFR-β标记的周细胞共定位。（U）NeuN、GFAP、Iba-1、CD31、PDGFR-β和CHOP共阳性细胞的半定量分析。比例尺为30μm，n=5/组。小结（1）TBI后，ERS相关蛋白p-eIF2α、GRP78及CHOP呈时序性表达表达，并于伤后2d及3d呈峰值表达；（2）CHOP蛋白可与神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、血管内皮细胞和周细胞等NVU主要组成细胞共定位表达。

18第二部分脑外伤后Salubrinal通过抑制内质网应激、自噬和凋亡发挥神经保护作用台的时间上表现出更大的延迟。TBI后，Sal+TBI组动物在第10天到第13天的寻找平台时间相对于Veh+TBI组小鼠明显减少；伤后第14天，相对于Veh+TBI组小鼠，Sal+TBI组小鼠在平台象限区的时间明显延长（以上结果见图4B-C）。上述研究数据说明Salubrinal治疗可以促进学习记忆功能的恢复。（4）TBI后第21天，与TBI+Veh组相比，TBI+Sal组小鼠脑损伤的体积明显减少（以上结果见图4D），表明Salubrinal可以防止TBI后神经细胞的丢失与减少。图3.（A-D）伤后第2天Veh+TBI组小鼠皮质及海马CA1、CA3和DG区PI阳性细胞。（E-H）伤后第2天Sal+TBI组小鼠皮质及海马CA1、CA3和DG区PI阳性细胞。（I）PI阳性细胞的定量显示，TBI后第2天，相较于Veh+TBI组，Sal+TBI组小鼠皮质及海马CA1、CA3和DG区的PI阳性细胞数量明显减少。#P<0.05,##P<0.01或###P<0.001与Veh+TBI组小鼠相比。比例尺为50μm，n=5/组。

【参考文献】：
期刊论文
[1]缺氧预处理对颅脑损伤大鼠皮质内质网应激蛋白P-eIF2α表达的影响[J]. 刘光杰,刘家传,王金标,杨艳艳,张星,王春琳,汤宏,徐燊.  中国微侵袭神经外科杂志. 2016(02)

硕士论文
[1]GRP78及CHOP在SAH后神经元细胞凋亡中作用的研究[D]. 黄啸元.石河子大学 2015
[2]内质网应激通过自噬途径对蛛网膜下腔出血后早期脑损伤发挥神经保护作用[D]. 张立新.浙江大学 2014



本文编号：3395094