PD-L1延迟脓毒血症PMN凋亡机制初探

发布时间：2021-09-29 22:13

　　目的:探讨程序性死亡配体1（Programmed death ligand 1,PD-L1）对脓毒血症中性粒细胞（Polymorphonuclear neutrophil,PMN）延迟凋亡的调控作用及可能机制。方法:（1）分别采集18例脓毒血症患者和18例健康志愿者的静脉外周血,采用Ficoll密度梯度离心法分离中性粒细胞（Polymorphonuclear neutrophil,PMN）。（2）采用台盼蓝和怀特-姬姆萨混合染色法对PMN的纯度和活力进行检测。（3）分别在体外培养PMN细胞5 h、10 h和20 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡;（4）采用琼脂糖趋化实验检测PMN趋化性。（5）培养18例脓毒血症患者的PMN,通过Annexin V-FITC/PI双染色法分析细胞凋亡率,采用Western Blot技术检测PD-L1的表达量。（6）取健康志愿者的PMN,采用干扰素-γ（Interfero-gama,IFN-γ）和干扰素-γ/脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）激活PD-L1的表达;采用RNA干扰技术沉默PD-L1;采用流式细胞术检测PMN细胞的凋亡率,采... 

【文章来源】：西南医科大学四川省

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

怀特-姬姆萨染色（A）和台盼蓝

表 1-5 脓毒血症 PMN 和健康 PMN 细胞凋亡率比较 Table 1-5 Early apoptosis results of PMN in the two groups 不同时间点凋亡率 空白对照组 (n=5) 脓毒血症组 (n=5) F P 5h（%） 61.42±7.82 18.64±3.68 50.82 P＜0.05 10h（%） 64.91±4.16 27.90±6.35 119.31 P＜0.05 20h（%） 81.25±11.67 34.46±3.21 122.552 P＜0.05

274脓毒血症病人PMN趋化性受到抑制fMLP为PMN的趋化物，使用琼脂糖凝胶法检测各组PMN趋化性实验结果图1-3和图1-4所示：脓毒血症病人PMN趋化距离为1215.33±17.89μm，显著小于正常对照组（1432.67±11.67μm）差异具有统计学意义（P＜0.05）。表明，脓毒血症病人体内PMN的趋化性明显受到抑制。图1-3PMN趋化性实验结果注：与空白对照组相比*P＜0.05；Figure1-3ExperimentalresultsofchemotaxisofneutrophilsNote:Comparedwiththeblankcontrolgroup,*P＜0.05A：正常对照组B：脓毒血症组图1-4PMN趋化性Figure1-4Chemotaxisofneutrophils

【参考文献】：
期刊论文
[1]中性粒细胞与淋巴细胞比值在脓毒症诊断及预后评估中的作用[J]. 蒋剑文,郭端,蒋涵,贾超.  海南医学院学报. 2019(19)
[2]脓毒血症患儿血脂、乳酸水平变化与预后关系的探讨[J]. 谭晓明,李梅爱,邝婉仪.  国际检验医学杂志. 2016(16)



本文编号：3414573