Cdc42缺失介导的气道上皮屏障下降和修复延迟在急性肺损伤中的作用及机制

发布时间：2021-11-04 19:21

　　急性肺损伤是呼吸系统常见危重症之一。急性肺损伤的病理生理变化主要是肺泡上皮及血管内皮细胞屏障功能的下降,导致肺水肿,保持肺泡毛细血管膜的屏障功能的完整性以及促进肺泡毛细血管膜损伤后的修复,对于减轻和防治急性肺损伤具有重要意义。但气道上皮屏障功能下降以及损伤修复障碍在急性肺损伤中的作用目前研究甚少。细胞分裂周期蛋白42（Cdc42）具有调控细胞周期、促进细胞增殖、迁移及维持细胞间连接等生物学活性,缺失cdc42所导致的气道上皮细胞屏障下降和损伤修复延迟对急性肺损伤的影响,目前还不明确。本课题旨在探索Cdc42缺失介导的气道上皮屏障下降和修复延迟在急性肺损伤中的作用及机制,为进一步明确气道上皮细胞屏障功能和损伤修复在急性肺损伤的作用,并寻找急性肺损伤治疗的相应靶点奠定研究基础。研究方法:第一部分:研究敲除cdc42对气道上皮细胞屏障功能和损伤修复的影响1.体内实验:1.1通过利用Cre/loxp技术构建气道上皮细胞特异性敲除Cdc42基因小鼠模型。1.2收取对照组及cdc42敲除组小鼠的肺组织,通过免疫组化染色评估气道上皮细胞增殖情况及细胞间连接蛋白的表达及分布情况。2.体外实验:2.1通... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１构建气道上皮细胞特异性敲除Ｃｄｃ４２的小鼠模型

Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ作为气道上皮细胞间黏附连接蛋白的重要组成分子，可用于评??价气道屏障功能。因此，我们通过对照组和敲除Ｃｄｃ４２基因小鼠的肺组织切片??进行Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ的免疫组化染色，评估其在气道上皮的分布情况（如图２Ａ），结??果显示，敲除组的气道上皮Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ明显减少且连续性中断，同时我们检测??对照组和敲除Ｃｄｃ４２基因小鼠肺组织中的Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白水平（如图２Ｂ），结??果显示：对比对照组的小鼠肺组织，敲除组小鼠的肺组织中Ｅ—ｃａｄｈｅｒｉｎ蛋白表??达水平明显下降。以上结果均提示：敲除Ｃｄｃ４２的小鼠气道上皮细胞屏障功能??下降??Ａ．??ＷＴ?ＫＯ??ｍｍ，??２８??

３．１．３敲除Ｃｄｃ４２的小鼠气道上皮增殖能力下降??为研究气道上皮细胞増殖能力，我们通过利用ＢｒｄＵ免疫荧光染色评估气??道上皮细胞的增殖能力。从图３Ａ结果显示：对照组小鼠气道中处于增殖期的??上皮细胞数量明显多于敲除组小鼠的气道中处于增殖期的上皮细胞数量。图３Ｂ??结果提示：对照组小鼠气道中处于增殖期的上皮细胞比例也明显大于敲除组小??鼠的气道中处于增殖期的上皮细胞比例，揭示Ｃｄｃ４２的活性水平与气道上皮细??胞的增殖能力呈正相关关系。Ｃｄｃ４２可通过促进气道上皮细胞发生增殖，调控??气道上皮屏障功能的维持，亦可作为启动损伤后气道上皮屏障修复的重要调控??因素。??２９??

【参考文献】：
期刊论文
[1]气道防御屏障[J]. 吴晓东,施毅.  中国呼吸与危重监护杂志. 2011(03)
[2]Rho蛋白家族的生物活性[J]. 朱正.  国外医学(生理、病理科学与临床分册). 2002(03)

硕士论文
[1]Cdc42在急性肺损伤中对肺微血管内皮细胞再生修复的影响及机制[D]. 吕嘉文.南方医科大学 2017



本文编号：3476310