大黄素通过抑制NF-κB和HIF-1a信号通路改善缺氧和LPS诱导的肠上皮屏障损伤

发布时间：2021-12-16 21:33

　　论文一大黄素对脂多糖诱导肠上皮细胞缺氧诱导因子-1a/环氧化酶-2通路的干预一、目的观察脂多糖（LPS）处理肠上皮细胞对缺氧诱导因子-1a（HIF-la）及下游炎症相关靶基因环氧化酶-2（COX-2）表达的影响,探讨大黄素干预的可能作用靶点。二、方法建立LPS处理人肠上皮细胞的体外实验模型。1.用Western blot检测LPS不同剂量和不同时间处理组的HIF-la和COX-2蛋白表达的变化趋势；检测LPS和不同剂量大黄素共同干预组的HIF-1a、COX-2、NF-κB抑制因子（IκB-a）和核转录因子-κB （NF-kB）蛋白表达的变化趋势。2.用PCR检测LPS处理组与LPS和大黄素共同干预组HIF-la的mRNA水平。3.用MTT法检测大黄素对肠上皮细胞增殖情况的影响。数据采用单因素方差分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。三、结果1.LPS作用可引起HIF-1a表达升高,且有时间和剂量效应关系。随LPS浓度的增加,HIF-la的表达量先增高后降低,在浓度为10-3mg/ml时HIF-1a表达量最高（P<0.05）。作用时间在0.5h HIF-1a表达达峰值,到... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略语/符号说明
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、大黄素对脂多糖诱导肠上皮细胞缺氧诱导因子-1α/环氧化酶-2通路的干预
    1.1 材料与方法
        1.1.1 主要试剂
        1.1.2 细胞培养和LPS及大黄素干预模型
        1.1.3 Western blot
        1.1.4 PCR
        1.1.5 四甲基偶氮唑盐法(MTT)
        1.1.6 统计学处理
    1.2 结果
        1.2.1 Western blot结果LPS不同剂量处理组
        1.2.2 LPS不同作用时间组
        1.2.3 LPS和大黄素干预组
        1.2.4 PCR结果
        1.2.5 MTT结果
    1.3 讨论
        1.3.1 HIF-la在肠屏障功能作用的争议
        1.3.2 LPS时间和浓度依赖性实验中HIF-la变化的可能原因
        1.3.3 LPS诱导HIF-la和NF-κB途径的交互作用
        1.3.4 大黄素的保护作用机制
    1.4 小结
二、缺氧再复氧和脂多糖激活肠上皮细胞核转录因子-κB和低氧诱导因子-1α信号通路及大黄素干预作用
    1.1 材料与方法
        1.1.1 材料
        1.1.2 细胞培养和实验分组
        1.1.3 Western blot
        1.1.4 细胞形态观察
        1.1.5 统计学处理
    1.2 结果
        1.2.1 H组和H+LPS组的NF-κB和HIF-1a通路的变化趋势
        1.2.2 HR组和HR+LPS组的NF-KB和HIF-1a通路的变化趋势
        1.2.3 E共同作用组的NF-κB和HIF-1a通路的变化趋势
        1.2.4 E后处理组的NF-κB和HIF-1a通路的变化趋势
        1.2.5 显微镜观察
    1.3 讨论
    1.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
附录
综述
    综述参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]重症急性胰腺炎血行感染患者肠屏障功能障碍的研究[J]. 余杨梓,傅强,华鹂鹂.  中国中西医结合急救杂志. 2012 (04)
[2]硫化氢对心肺复苏后大鼠心肌缺氧诱导因子-1α的影响[J]. 陈娣,潘昊,李醇文,兰秀彩,刘蓓蓓,杨光田.  中华急诊医学杂志. 2011 (07)
[3]脑出血灶周缺氧诱导因子-1a表达与脑水肿的关系[J]. 刘庆新,陈金波,朱玉红,张合亮.  中华急诊医学杂志. 2007(09)
[4]大黄对危重症患者胃肠道的保护作用[J]. 陈德昌,景炳文,杨兴易,宋志芳,严鸣,赵良,单红卫,余康龙,张翔宇,马钧.  中国危重病急救医学. 2000(02)
[5]高渗盐溶液对肠缺血/再灌注损伤兔肠屏障功能保护的时相性研究[J]. 徐军,郑亮亮,梁璐,刘业成,张晖,李毅,徐腾达,朱华栋,王仲,于学忠,马遂.  中国危重病急救医学. 2013 (06)



本文编号：3538855