Wnt/β-catenin信号通路对hUC-MSCs肝向分化的影响

发布时间：2022-12-11 04:47

　　[目的]探寻Wnt/β-catenin信号通路对诱导hUC-MSCs肝样细胞分化的影响及其机制。[方法]1.hUC-MSCs原代分离培养与鉴定:采用组织块贴壁法分离培养hUC-MSCs,经贴壁筛选纯化后,培养并传代,取第4代贴壁生长的细胞制备成单细胞悬液,运用流式细胞仪对细胞分子标志进行检测鉴定,并将hUC-MSCs诱导分化为成脂、成骨细胞,对其多向分化能力进行鉴定,以鉴定获得细胞性质和质量。2.检测Wnt/β-catenin信号通路激活剂与抑制剂对hUC-MSCs肝样分化的影响:将培养至第4-6代hUC-MSCs分成四组,分别为对照组（10%FBS的DMEM培养液培养）,常规诱导肝向分化组,激活剂Wnt3a组（在常规诱导肝向分化基础上加入20ng/ml激活剂Wnt3a）,抑制剂Dkk-1组（在常规诱导肝向分化基础上加入20ng/ml抑制剂Dkk-1）。各组分别在第7、14、21、28天收集细胞,采用荧光定量PCR检测与肝细胞分化相关基因如AFP、ALB、HNF4α、CK-19、TAT 和 Wnt/β-catenin 信号通路关键分子 Wnt1、β-catenin、GSK-3β mRN... 

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期刊论文
[1]Hepatocytic differentiation of mesenchymal stem cells in cocultures with fetal liver cells[J]. Claudia Lange,Helge Bruns,Dietrich Kluth,Axel R Zander,Henning C Fiegel.  World Journal of Gastroenterology. 2006(15)
[2]Hepatogenic differentiation of mesenchymal stem cells induced by insulin like growth factor-Ⅰ[J]. Maryam Ayatollahi,Masoud Soleimani,Seyed Ziaadin Tabei,Maryam Kabir Salmani.  World Journal of Stem Cells. 2011(12)
[3]HNF-4α determines hepatic differentiation of human mesenchymal stem cells from bone marrow[J]. Mong-Liang Chen,Kuan-Der Lee,Huei-Chun Huang,Yue-Lin Tsai,Yi-Chieh Wu,Tzer-Min Kuo,Cheng-Po Hu,Chungming Chang.  World Journal of Gastroenterology. 2010(40)
[4]人脐带间充质干细胞与肝细胞共培养可分化为肝样细胞[J]. 李华,文峰,漆仲春,周进军,朱亚杰,程朋,魏东,苏晓妹,谭勇,彭晶晶,罗巧丽,李东,张涛.  中国组织工程研究. 2013(32)
[5]Mesenchymal stem cells from the human umbilical cord ameliorate fulminant hepatic failure and increase survival in mice[J]. Jin-Feng Yang,Hong-Cui Cao,Qiao-Ling Pan,Jiong Yu,Jun Li,Lan-Juan Li.  Hepatobiliary ＆ Pancreatic Diseases International. 2015(02)



本文编号：3718166