CCN1在脂多糖诱导急性肺损伤中的表达调控和在炎症反应中的作用

发布时间：2023-02-13 19:12

　　目的:体内观察富半胱氨酸蛋白61(CYR61/CCN1)在正常肺组织中的表达定位和在脂多糖(LPS)诱导小鼠急性肺损伤中的表达变化,体外研究LPS调控CCN1表达的分子机制和CCN1在LPS诱导炎症介质表达中的作用。方法:分别通过免疫组化(IHC)染色及免疫荧光法观察CCN1在小鼠肺组织和气道上皮细胞16HBE中的表达定位;气道滴注LPS建立小鼠急性肺损伤模型,IHC观察CCN1在肺组织中的表达变化;体外研究中,分别予气道上皮16HBE细胞以ERK1/2、JNK、P38和PI3K信号通路特异性抑制剂预处理2 h后加入LPS刺激,通过RT-qPCR和Western blot检测CCN1的mRNA和蛋白表达变化;分别通过CCN1-siRNA和重组CCN1蛋白刺激16HBE细胞,qPCR检测炎症介质白细胞介素6(IL-6)、IL-8、转化生长因子β(TGF-β)和血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA水平。结果:CCN1在正常肺组织中以气道上皮表达为主,在LPS诱导的急性肺损伤小鼠气道上皮细胞中CCN1表达升高;LPS可刺激16HBE细胞中CCN1的表达水平升高,其中ERK1/2、JNK、P...

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【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 材料和仪器
    2 实验方法
        2.1 动物模型复制
        2.2 免疫组化染色
        2.3 免疫荧光染色
        2.4 RT-qPCR
        2.5 Western blot实验
        2.6 siRNA转染
    3 统计学处理
结 果
    1 CCN1在气道上皮中的定位与表达
    2 LPS诱导气道上皮CCN1的表达升高
    3 ERK1/2、JNK、P38和PI3K信号传导途径参与LPS诱导的CCN1表达
    4 CCN1参与LPS诱导的炎症介质IL-6、IL-8、TGF-β和VEGF的mRNA合成
讨 论



本文编号：3742147