人胎盘间充质干细胞肝细胞生长因子下调对急性肺损伤肺血管内皮修复的影响

发布时间：2024-02-01 16:24

　　目的:通过分离、培养人胎盘间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC),构建肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)低表达的人胎盘MSC细胞株,作用于急性肺损伤(acute lung injury,ALI)肺血管内皮细胞及动物模型,探究人胎盘间充质干细胞HGF下调对急性肺损伤肺血管内皮修复的影响。方法:(1)(1)采用酶消化法分离人胎盘MSC。(2)光镜下观察细胞形态及生长状况,特定培养条件下诱导其向脂肪、骨、软骨细胞分化,流式细胞仪检测细胞抗原表型,鉴定分离的细胞具备MSC的一般特性。(3)比较人胎盘、骨髓、脂肪来源的间充质干细胞HGF分泌水平。(2)(1)检测人胎盘MSC对LPS诱导的肺血管内皮细胞通透性的影响及HGF分泌水平:构建人胎盘MSC与人肺微血管内皮细胞(human pulmonary microvascular endothelial cell,HPMVEC)Transwell共培养体系,设置正常对照组(Control组)、ALI模型组(LPS组)、人胎盘MSC组(LPS+MSC组),Transwell共培养体系共...

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【部分图文】：

图1-1光镜下人胎盘MSC形态特征

硕士学位论文第一部结果充质干细胞形态及生长情况间充质干细胞形态特征-1所示，从胎盘组织获取的原代细胞，培养48h后，倒置显微镜下观察壁生长，呈短梭形或长条状，形态不均一。随着传代次数的增加，细呈长梭形或纤维细胞样，核明显，增殖旺盛，呈现旋涡状或辐射状生

图1-3人胎盘MSC抗原表型的鉴定

图1-2细胞生长曲线2.人胎盘间充质干细胞抗原表型的鉴定如图1-3所示，第3代人胎盘MSC表面标记分子CD105、CD90、CD73阳性率分别为99.1%、96.0%、99.8%，CD45、CD34、CD14阳性率分别为1.0%、0.3%、0.3%，符....

图1-2细胞生长曲线

图1-2细胞生长曲线人胎盘间充质干细胞抗原表型的鉴定如图1-3所示，第3代人胎盘MSC表面标记分子CD105、CD90、CD799.1%、96.0%、99.8%，CD45、CD34、CD14阳性率分别为1.0%、0.3典型的MSC抗原表型特征。

图1-4成脂诱导分化

学硕士学位论文间充质干细胞多向分化潜能的鉴定导分化4代分裂增殖的人胎盘MSC接种于6孔板，当细胞贴壁融合度达的成脂诱导分化培养基，于诱导第6d，可见孔内有细小、折诱导时间的延长，脂肪颗粒数目逐渐增多，互相融合呈泡状，肪颗粒，细胞逐渐变得圆钝，直至诱导第21d....

本文编号：3892419