急性心肌梗死患者血浆外泌体mRNA表达谱分析

发布时间：2024-03-24 08:27

　　目的比较分析急性心肌梗死(AMI)患者和非心源性胸痛(NCCP)患者血浆外泌体中mRNA的表达差异,并探讨差异表达mRNA对AMI发生发展可能的影响。方法入选北京朝阳医院和内蒙古包头市中心医院NCCP患者和AMI患者各15例。提取入选者血浆外泌体及外泌体总RNA,高通量测序技术检测AMI患者和NCCP患者血浆中外泌体信使RNA(mRNA)的表达谱,筛选出AMI患者中差异表达的mRNA。对差异表达mRNA进行基因本体(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析。结果提取的外泌体为粒径在30～200 nm之间的双层膜小囊泡,表达外泌体标志分子分化簇63(CD63)和热休克蛋白70(HSP70),而不表达甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH),符合外泌体的特征。对入选AMI患者和NCCP患者血浆外泌体中的mRNA表达量进行检测,AMI患者血浆中外泌体转录本数量为64 258条,NCCP患者血浆中外泌体转录本数量为64 374条。其中差异表达的mRNA共1 800条(上调951条,下调849条)。GO和KEGG分析表明上述差异表达的mRNA参与了AMI的生物学调节功能和通路。结...

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图2.TEM图像显示从血浆中提取的外泌体

透射电镜下观察到提取的囊泡大小不均,呈圆形或类圆形,具有脂质双层膜,直径在30～200nm之间,符合外泌体的形态特征(图2)。2.4外泌体特异性分子标志

图3.外泌体标志蛋白CD63和HSP70的Westernblot分析

免疫印迹实验结果显示,提取到的囊泡表达特异性标志蛋白CD63和HSP70,而不表达GAPDH(图3),符合外泌体的特征。2.5外泌体已知mRNA表达量

图1.外泌体粒径大小及浓度的分析

表1.两组基本临床资料的比较(n=15)Table1.Comparisonofbasicclinicaldatabetweenthetwogroups(n=15)指标AMI组NCCP组P男/[例(%)]12(80.0)8(66.7)0.054....

图6.差异表达mRNAs的KEGG途径

图5.差异表达mRNA的GO分析2.8差异表达mRNAKEGG分析

本文编号：3937205