Neuritin蛋白在大鼠脑损伤后时相性表达的研究

发布时间：2017-07-02 06:02

  本文关键词：Neuritin蛋白在大鼠脑损伤后时相性表达的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：创伤性颅脑损伤(traumatic brain injury TBI)是指头部突然受到外力的撞击，导致的颅骨、脑膜、脑血管、脑组织、脑神经的结构改变、破坏，，而造成的损伤。TBI在所有的创伤类型中，其死亡率和致残率是最高，预后差。各类神经营养因子为TBI的预后营造了良好的基础环境，在防止TBI后神经细胞的退变和凋亡等方面均发挥着重要的作用。Neuritin作为一种新的神经可塑性相关的神经营养因子，在颅脑损伤后的表达情况及表达规律，目前尚不清楚。 目的：通过建立大鼠创伤性脑损伤模型，检测神经突出蛋白(neuritin)在大鼠TBI后不同时间点脑组织中表达情况及规律，探讨neuritin蛋白在大鼠脑损伤后修复过程中的意义，为进一步研究neuritin蛋白在脑损伤后神经营养作用奠定一定的基础。 方法：42只SD大鼠随机分为正常组（n=6）和手术组（n=36）。手术组分为对照组和实验组，对照组为左侧大脑半球，实验组为右侧大脑半球，术后分为6小时、12小时、24小时、3天、7天、14天6个亚组，每组6只。通过改良Feeney法建立大鼠脑损伤模型，使用八臂迷宫对模型进行神经行为学评分。HE染色观察不同时间点脑挫裂伤组织及神经细胞形态变化。应用免疫组化检测不同时间点脑挫裂伤组织中neuritin蛋白的表达情况，Western-blot检测脑损伤后脑挫裂伤组织中neuritin蛋白的表达量变化。 结果：八臂迷宫评分结果显示：建模后大鼠的工作记忆错误次数、参考记忆错误次数和测试时间较术前增加，具有统计学意义（p0.05）。HE染色发现：实验组6小时神经元细胞开始出现水肿，24小时水肿达到高峰，3天出现大量坏死，7天胶质细胞大量增生，14天恢复正常，对照组各时间点与正常组无明显变化。免疫组化检测显示：实验组6小时观察到神经细胞胞膜、胞浆阳性表达增高，12小时-7天呈强阳性表达，14天表达明显降低，呈弱阳性；对照组、正常组均呈弱阳性表达。Western-blot检测neuritin蛋白含量显示：实验组6小时开始增高，24小时达到高峰，3天稍降低持续到7天，与对照组、正常组均有统计学差异(p＜0.01)，14天明显降低较正常组仍有统计学差异(p＜0.05)。 结论：创伤性颅脑损伤后，neuritin蛋白在脑损伤组织中表达明显增高，并有一定的时相性，提示neuritin蛋白可能在脑损伤后修复过程中起着重要作用。
【关键词】：Neuritin 创伤性脑损伤 时相性表达
【学位授予单位】：石河子大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R651.15
【目录】：

• 附件3-6
• 摘要6-7
• Abstract7-8
• 目录8-9
• 英文缩略词表9-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-25
• 1、实验材料13-16
• 1.1 实验动物13
• 1.2 主要仪器与器械13-14
• 1.3 主要试剂14
• 1.4 溶液配制14-16
• 2、实验方法16-25
• 2.1 实验技术路线16-17
• 2.2 八臂迷宫实验17
• 2.3 实验动物分组17-18
• 2.4 改良 Feeney 法建立大鼠 TBI 模型18
• 2.5 八臂迷宫检测神经行为学18-19
• 2.6 标本采集19
• 2.7 石蜡切片制作19-20
• 2.8 HE 染色观察脑组织形态学变化20
• 2.9 免疫组化染色观察脑组织中 neuritin 蛋白的表达情况20-21
• 2.10 Western-blot 检测脑组织中 neuritin 蛋白的表达量21-24
• 2.11 统计学方法24-25
• 实验结果25-31
• 1.八臂迷宫神经行为学评分结果25-26
• 2.完整的脑组织形态26-27
• 3. HE 染色鉴定 TBI 模型27
• 4. HE 染色观察挫裂伤灶神经细胞形态变化27-28
• 5. 免疫组化染色观察脑组织中 Neuritin 表达的情况28-29
• 6. Western-blot 检测脑组织中 Neuritin 表达量的变化29-31
• 讨论31-34
• 结论和展望34-35
• 参考文献35-39
• 综述39-47
• 参考文献44-47
• 致谢47-48
• 作者简介及在学期间成果48

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本文编号：508707