高压电烧伤大鼠血清TPO、M-CSF的变化及乌司他

发布时间：2017-07-26 06:01

  本文关键词：高压电烧伤大鼠血清TPO、M-CSF的变化及乌司他丁、甲基强的松龙的干预作用

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【摘要】：目的：高压电烧伤是烧伤范畴中的特殊分类，可引起创面局部及全身远隔组织的微循环障碍，导致组织及器官的缺氧、缺血，影响着病情的发展变化。血细胞流变行为的异常则是微循环血流动力学紊乱的重要变化之一，其中血小板流变行为异常在微循环障碍发生、发展中起到重要作用。高压电烧伤损失血管内皮后，血小板激活、活化，相继发生炎性介质的释放、血液粘度的增加、微血栓的形成等变化，从而影响微循环血液流动。血清血小板生成素（TPO）、巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）是调节血小板生成的重要因子及体内主要的炎症性因子，本实验旨在研究高压电烧伤早期大鼠TPO、M-CSF的变化，并通过乌司他丁（UTI）、甲基强的松龙（MP）进行干预，进一步讨论高压电烧伤致血小板流变学异常的相关机制及干预办法。 方法： 1实验动物分组：健康成年雄性SD大鼠（由河北医科大学动物实验中心提供，合格证编号为1303144）240只，按照随机数字表法分成四组，即假高压电烧伤组（简称对照组）、高压电烧伤组（简称电伤组）、高压电烧伤乌司他丁（UTI）治疗组（简称：UTI治疗组）及甲基强的松龙（MP）治疗组（简称：MP治疗组），每组各60只。每组再分别按观察时间分为电击前15min、电击后5min、电击后1h、2h、4h、8h六个时相组，每个时相10只。 2实验前准备：将大鼠编号、称重，备皮左上肢、右下肢及前胸。将实验药品按所需要浓度配制好备用。 3高压电烧伤模型制作：正确连接实验变压器和调压器电线连接。使用1%戊巴比妥钠于大鼠腹腔注射，药量按40mg/kg给药。大鼠麻醉成功后，将其置于专用电击实验台上，取仰卧位，固定四肢，将两个大小约1cm×1cm的电极片分别固定于大鼠的左上肢（电流入口）及右下肢（电流出口）脱毛区。首先接通电源，调整调压器输出电压至2kV，然后连接闭合线路，使高压电流通过大鼠，持续电击3s。对照组则制作假电伤模型，只固定电极片不通电，其余步骤与电伤组一致。在电击后5min内，UTI治疗组大鼠给予腹腔注射5×104u/kg UTI，MP治疗组给予腹腔注射250mg/kg MP，电伤组及对照组则腹腔注射等量的生理盐水。 4标本采集与保存：固定模型复制成功的大鼠于实验手术台，给予开胸暴露心脏后使用一次性真空采血管直视心脏下采血6mL，轻轻颠倒数次，静置30min后放入离心机中，以3000转/min离心10min，并留取上清液置于Eppendorf管中，保存于在-70℃条件下。 5指标检测：血清样本采用的实验方法是酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）中的双抗体夹心法，检测四组大鼠六个时相中血清TPO、M-CSF含量。 6实验数据处理：采用SPSS13.0统计软件，行两因素析因设计的方差分析，多重比较采用LSD法t检验。以P＜0.05为显著性检验水准。 结果： 1大鼠血清TPO含量变化 电伤组血清TPO含量总体较对照组高（主效应F=140.145，P＜0.01），且TPO含量受伤后时间变量影响，各时相组有显著差异（主效应F=7.747，P＜0.01），呈趋势为逐渐增高，且伤后5min、1h、2h、4h及8h均高于伤前组（P＜0.05）。乌司他丁治疗组血清TPO含量总体低于电伤组（主效应F=47.827，P＜0.01），且TPO含量治疗后受时间变量影响，各时相组有显著差异（主效应F=27.264，P＜0.01），伤后5min、1h、2h、4h均高于伤前组（P＜0.05），但是伤后8h与伤前无明显差异（P＞0.05）。甲强龙治疗组血清TPO含量总体低于电伤组（主效应F=276.764，P＜0.01），且TPO含量治疗后受时间变量影响，各时相组有显著差异（主效应F=5.632，P＜0.01），但只有治疗组伤后8h低于本组伤前值（P＜0.05），伤后5min、1h、2h、4h与伤前无明显差异（P＞0.05）。 2大鼠血清M-CSF含量变化 电伤组血清M-CSF含量总体较对照组高（主效应F=23.006，P＜0.01），且M-CSF含量受伤后时间变化，各时相组有显著差异（主效应F=3.391，P＜0.01），呈增高趋势，且伤后5min、1h、2h高于伤前值（P＜0.05），但伤后4h、8h与伤前值无明显差异（P＞0.05）。乌司他丁治疗组M-CSF含量总体低于电伤组（主效应F=18.947，P＜0.01），且M-CSF含量治疗后受时间影响，各时相组有显著差异（主效应F=4.494，P＜0.01），治疗组伤后4h低于本组伤前值（P＜0.05），其余时相与伤前组无明显差异（P＞0.05）。甲强龙治疗组M-CSF含量总体低于电伤组（主效应F=7.182，P＜0.01），且M-CSF含量治疗后受时间影响，各时相组有显著差异（主效应F=3.571，P＜0.01），治疗组伤后8h低于伤前值（P＜0.05），其余各时相与本组伤前值均无明显差异（P＜0.05）。 结论： 1高压电烧伤早期大鼠血清中TPO含量升高，且于伤后8h内呈升高趋势，证明高压电烧伤致血小板血流动力学改变，影响微循环的血液流动。 2高压电烧伤早期大鼠血清中M-CSF含量升高，且于伤后8h内呈升高趋势，证明高压电烧伤后体内炎症反应活跃。 3高压电烧伤UTI、MP治疗组TPO、M-CSF与电伤组比较含量降低，提示UTI、MP治疗可以抑制炎症反应，，改善凝血功能，防止血栓形成从而改善微循环。
【关键词】：烧伤 电 微循环 血小板生成素 巨噬细胞集落刺激因子 乌司他丁 甲基强的松龙
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R644
【目录】：

• 摘要4-7
• ABSTRACT7-11
• 前言11-12
• 材料与方法12-14
• 结果14-16
• 附图16-24
• 附表24-27
• 讨论27-31
• 结论31
• 参考文献31-36
• 综述36-46
• 参考文献42-46
• 致谢46-47
• 个人简历47

【参考文献】

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本文编号：574959