Ang2在急性肺损伤中的作用及其机制研究

发布时间：2017-08-13 22:02

  本文关键词：Ang2在急性肺损伤中的作用及其机制研究

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【摘要】：第一部分大鼠急性肺损伤模型的制备及取材时间选择目的探讨制备大鼠急性肺损伤模型过程中取材时间的选择,为成功建立急性肺损伤的动物模型提供科学依据。方法30只成年雄性SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(对照组)6只和脂多糖组24只。脂多糖组大鼠尾静脉注射浓度为10mg/kg脂多糖1 ml建立急性肺损伤模型,对照组大鼠尾静脉注射l ml生理盐水。对照组和脂多糖组于注药后1、3、6、12 h各取大鼠6只,检测肺组织湿、干重比,采用光镜观察肺组织病理形态学,采用免疫组织化学检测血管内皮生长因子表达情况,采用ELISA法检测血清白细胞介素-6和血管内皮生长因子表达情况。结果注射脂多糖1 h后,脂多糖组光镜下可见肺间质水肿和炎症细胞浸润;脂多糖组1、3、6、12 h时肺组织湿/干重(5.57±0.55、5.81±0.81、6.11±0.68、5.84±0.52)、肺损伤评分((1.17±0.41)、(2.33±0.52)、(3.50±0.55)、(2.83±0.75)分)、血清白细胞介素-6((31.33±6.95)、(78.33±7.53)、(95.17±10.93)、(72.00±10.30)pg/ml)和血管内皮生长因子((228.17±17.30)、(284.33±18.74)、(384.50±29.22)、(316.33±26.80)pg/ml)水平明显高于对照组((5.19±0.98)、(0.00±0.00)分、(9.00±3.85)pg/ml、(197.50±15.18)pg/ml)(P0.05),其中6 h时明显高于1、3、12 h时;3、12 h时高于1 h时(P0.05)。结论尾静脉注射10 mg/kg脂多糖在6 h时可成功复制大鼠急性肺损伤模型。第二部分血管生成素2在急性肺损伤中的作用目的:探讨血管生成素2(Ang-2)在急性肺损伤(AL I)发生、发展中的作用。方法:清洁级SD大鼠共48只,随机分为4组:正常对照组(12只),1mg/kg LPS组(12只),5mg/kg LPS组(12只),10mg/kg LPS组(12只)。HE染色光镜观察肺组织标本病理改变并进行肺损伤评分,用ELISA法以及Westernblot技术检测各组大鼠血浆以及组织中Ang-2的表达情况。结果:LPS注射进入大鼠尾静脉6h后,光镜下可见肺间质水肿和炎症细胞浸润,肺湿/干重比(W/D)增加,血清中Ang-2的表达水平较对照组显著增高(P0.05),并且不同剂量LPS与Ang-2的表达水平呈现剂量效应关系。结论:Ang-2参与大鼠急性肺损伤的病理过程,且血清中Ang-2水平与急性肺损伤程度呈正相关。第三部分LPS致大鼠急性肺损伤Ang-2与肺组织凋亡变化的研究目的:观察内毒素致大鼠急性肺损伤过程中肺组织凋亡与Ang-2表达的关系,探讨LPS致大鼠急性肺损伤(ALI)的发病机制。方法:健康雄性SD大鼠48只,随机分成2组:①对照组:静注等量生理盐水;②LPS组:尾静脉注射LPS复制ALI大鼠模型,分别给予1mg/kg LPS(12只),5mg/kg LPS(12只),10mg/kg LPS(12只)后采集样品,采用免疫组化法检测肺组织中bcl-2、bax的水平,Caspase-3的蛋白表达;观察Ang2与大鼠细胞凋亡的关系。光镜观察肺组织病理变化,结果:与对照组比较.LPS组Ang-2表达随剂量增加而增强,免疫组化结果显示,LPS组随剂量增加Bcl-2减少,主要表现在肺上皮细胞,Bax增多,caspase-3蛋白表达水平增加;对照组无明显变化。结论:不同剂量LPS所致大鼠急性肺损伤中的Ang-2表达程度不同,抗凋亡蛋白Bcl-2和促凋亡蛋白Bax是ALl时调节细胞凋亡的途径之一;Ang-2可能通过调节Bcl-2和Bax平衡而影响肺组织凋亡。
【关键词】：急性肺损伤 内毒素 模型 脂多糖 血管内皮生长因子 血管生成素2 急性肺损伤 脂多糖 血管生成素2 急性肺损伤 细胞凋亡
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563.8
【目录】：

• 中英文缩略词6-7
• 摘要7-10
• Abstract10-13
• 前言13-16
• 参考文献15-16
• 第一部分 脂多糖致大鼠内毒素性肺损伤模型制备的研究16-31
• 引言16-17
• 材料与方法17-19
• 统计学处理19
• 结果19-28
• 讨论28-29
• 结论29-30
• 参考文献30-31
• 第二部分 血管生成素2在急性肺损伤中的作用31-42
• 引言31-32
• 材料与方法32-33
• 统计学方法33-34
• 结果34-39
• 讨论39-40
• 结论40
• 参考文献40-42
• 第三部分LPS致大鼠急性肺损伤Ang-2 与肺组织凋亡变化的研究42-54
• 引言42
• 材料与方法42-44
• 统计学方法44
• 结果44-51
• 讨论51-52
• 结论52
• 参考文献52-54
• 附录54-55
• 致谢55-56
• 综述56-60
• 参考文献59-60

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 朱耀斌;李晓锋;张燕搏;凌峰;刘爱军;刘迎龙;王强;;急性肺损伤动物模型[J];中华实用诊断与治疗杂志;2011年07期

2 庞彬;苏雪娟;丁旭青;;胸外科术后急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征临床分析[J];中华实用诊断与治疗杂志;2012年03期

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本文编号：669196