外源性NGAL对脓毒症大鼠急性肾损伤的肾保护作用及机制

发布时间：2017-08-23 19:47

  本文关键词：外源性NGAL对脓毒症大鼠急性肾损伤的肾保护作用及机制

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【摘要】：目的：探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)对大鼠脓毒症急性肾损伤有无保护作用及其相关机制。 方法：通过盲肠结扎穿孔法制备经典脓毒症大鼠急性肾损伤模型(CLP),将30只SD雄性大鼠随机分为假手术组(A组)、CLP+生理盐水(B组)、CLP+NGAL (C组),每组10只。取造模前(0h)、造模后24h大鼠静脉血,用于检测血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平；造模24h后处死所有大鼠,取右侧肾组织制作病理切片,采用苏木精-伊红(H-E)染色,观察肾脏形态学变化；免疫组织化学染色检测B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)和活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)的表达；末端转移酶标记技术(TUNEL)染色观察肾组织内细胞凋亡的情况。取左侧肾组织制备组织匀浆,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脂质氧化产物丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)含量。 结果：组内比较,B、C组24h肌酐及尿素氮水平较Oh升高明显,P0.05;组间比较,B、C组24h的肌酐及尿素氮水平较A组升高明显,P0.05,C组肌酐及尿素氮升高水平明显低于B组,P0.05。H-E染色观察下,B组肾损伤最明显,C组肾损伤情况较B组明显减轻。免疫组化结果显示A组Caspase-3和Bax蛋白阳性表达率分别为(0.43±0.25)%、(1.37±1.1)%,C组分别为(7.32±2.04)%、(22.26±2.20)%,均显著低于B组的(20.33±2.01)%、(49.2±8.55)%。TUNEL染色见A组肾脏组织偶见凋亡细胞,C组13.6±3.42个/高倍镜视野,显著低于B组的26.4±7.2个/高倍镜视野(P0.05)。ELISA检测结果显示,A组及C组MDA含量明显低于B组(P0.05),C组SOD含量明显高于B组(P0.05)。 结论：外源性NGAL可能通过抑制Caspase-3的激活,降低促凋亡蛋白Bax的水平,减少细胞凋亡,同时抑制脂质氧化,减轻组织损伤,起到保护肾脏的作用。图7幅,表7个,参考文献45篇。
【关键词】：NGAL 急性肾损伤 Caspase-3 Bax MDA SOD
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R459.7
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 目录8-10
• 符号说明10-11
• 前言11-13
• 第一部分 脓毒症大鼠AKI模型的制作13-18
• 1 材料与方法13-14
• 1.1 实验动物及主要试剂13
• 1.2 动物分组及模型制备13
• 1.3 标本采集13
• 1.4 方法13-14
• 1.5 统计学分析14
• 2 结果14-16
• 2.1 各组大鼠肾功能比较15-16
• 2.2 各组大鼠肾组织病理学改变16
• 3 讨论16-17
• 4 结论17-18
• 第二部分 NGAL对脓毒症急性肾损伤的作用研究18-27
• 1 材料与方法18-20
• 1.1 实验动物及主要试剂18
• 1.2 动物分组及模型制备18
• 1.3 标本采集18-19
• 1.4 方法19-20
• 1.5 统计学分析20
• 2 结果20-27
• 2.1 各组大鼠肾功能比较20-22
• 2.2 各组大鼠肾组织病理学改变22
• 2.3 肾组织细胞凋亡情况22
• 2.4 各组Caspase-3及Bax表达情况22-23
• 2.5 各组大鼠MDA及SOD检测结果23-27
• 讨论27-31
• 结论31-32
• 参考文献32-36
• 综述36-47
• 参考文献43-47
• 致谢47

【共引文献】

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本文编号：726966