针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠JNK信号通路影响差异性研究

发布时间：2017-10-22 07:36

  本文关键词：针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠JNK信号通路影响差异性研究

  更多相关文章： 针刺 氟西汀 强迫游泳 抑郁症 JNK信号通路 差异性

【摘要】：抑郁症是一种常见的精神疾病。以显著而持久的情绪低落、思维迟缓和意志活动减退为主要特征。抑郁症具有很高的致死致残率。抑郁症严重危害患者的身心健康和生活质量,同时给患者家属带来巨大的精神和经济负担。也能给社会造成经济负担。 抑郁症的发病与遗传、生物、心理、社会等多种因素有关。近年来,细胞信号转导通路在抑郁症发病与抗抑郁药物治疗中的作用受到越来越多的关注。 大量的文献报道,抑郁症针刺治疗疗效肯定。其作用机制与针刺能够调节神经内分泌和免疫系统功能紊乱有关。针刺对抑郁模型大鼠脑内信号转导通路影响的研究也逐渐增多。但针刺与抗抑郁药物对细胞信号转导通路影响的差异性研究尚未报道。 本研究拟选择精神药理学行为绝望强迫游泳动物模型,以行为学和JNK通路上与抑郁-应激关系密切的主要效应因子、促炎性细胞因子、HSP70为观察指标,观察在JNK信号通路阻断剂SP600125作用下针刺与氟西汀的抗抑郁作用的有效性,探讨针刺与氟西汀对模型大鼠脑内JNK信号通路影响的差异性。研究方法 1分组将旷场实验和糖水实验行为学评分近似,体重170±10g的48只SD大鼠,按照随机数字表分成正常组、正常+SP600125组(以下简称SP)、模型组、模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组,每组6只。 2造模方法选择模拟抑郁症病人行为绝望的强迫游泳应激模型。将大鼠放置盛有水温24±1℃自来水的透明玻璃缸中行强迫游泳应激15min.24h后再次进行强迫游泳6min,记录其后5min内游泳不动时间。用游泳不动时间评价行为学。 3干预方法正常组不给予任何干预。正常+SP组,仅腹腔注射SP600125(用DMSO溶解后,按10mg/kg腹腔注射)。模型+SP组,造模前30min腹腔注射SP600125。针刺组,造模前1h,取“百会”、“印堂”穴,用“百会透刺印堂”法留针20min。针刺+SP组,针刺穴位、方法及时间与针刺组相同,但针刺前30min腹腔注射SP600125。氟西汀组,造模前1h灌胃给药,按1.8mg/kg,用蒸馏水配成氟西汀溶液,按10ml/kg灌胃。氟西汀+SP组,给药剂量和方法与氟西汀组相同,但给药前30min腹腔注射SP600125。 4检测指标及方法用ELISA方法检测大鼠血清与海马内促炎性细胞因子IL-1βIL-6, TNF-a, HSP70的含量。Western blot法检测海马内MKK4, MKK7, JNK, p-JNK, c-jun的含量。RT-PCR方法检测海马内Caspase-3基因的表达。 研究结果 1行为学变化 正常组与正常+SP组大鼠游泳不动时间没有显著差异(P0.05)；与正常组比较,模型组大鼠游泳不动时间显著增加(P0.01)；与模型组比较,模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组大鼠游泳不动时间明显降低(P0.05,P0.01,P0.01,P0.01,P0.01)；模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组之间比较差异性没有统计学意义(P0.05)。 2血清与海马IL-1β、IL-6、TNF-a含量 各组大鼠血清与海马内IL-1β、IL-6、TNF-a含量变化趋势基本一致。正常组与正常+SP组之间比较,血清与海马内IL-1β、IL-6、TNF-含量无显著差异(P0.05)：与正常组比较,模型组大鼠血清与海马内IL-1β、IL-6、TNF-a含量均显著增加(均P0.01)；与模型组比较,模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组大鼠血清与海马内IL-1β、IL-6、TNF-a含量含量均显著降低(均P0.01)；模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组各组之间均有显著差异(均P0.01),氟西汀的降低作用优于针刺(P0.01)。 3海马内MKK4、MKK7的含量 正常组与正常+SP组之间比较,海马组织中MKK4、MMK7的含量无显著差异(P0.05)；与正常组比较,模型组大鼠海MMK4、MMK7著增加(均p0.01)；与模型组比较,氟西汀+SP组MKK4和MMK7含量降低比较明显(P0.05),模型+SP组、针刺组、针刺+sβ组、氟西汀组大鼠海马MKK4、MMK7含量虽有降低趋势,但差异性没有统计学意义(均P0.05)；针刺组与氟西汀组之间比较没有显著差异(P0.05)。 4海马JNK.p-JNK含量 海马JNK含量不同组别之间没有显著差异((均P0.05)。 海马β-JNK表达水平,正常组与正常+SP组之间无显著差异(P0.05)；模型组大鼠海马p-JNK表达较正常组显著增加(P0.01)；与模型组比较,模型+SP组、针刺组、针刺+sβ组、氟西汀组、氟西汀+SP组大鼠p-JNK表达显著降低(P0.05、P0.01、P0.01、P0.01、P0.01)；针刺组与氟西汀组之间比较无显著差异(P0.05)。 5海马c-jun的含量 海马c-jun含量,正常组与正常+SP组之间无显著差异(P0.05)；模型组大鼠海马c-含量较正常组明显增加(P0.01)；与模型组比较,模型+SP组、针刺组、针刺+sβ组、氟西汀组、氟西汀+SP组c-jun含量明显降低(P0.05,P0.05,P0.01,P0.01,P0.01)；氟西汀的降低作用较针刺更明显(P0.05)。 6海马Caspase-3基因表达 正常组与正常+SP组大鼠海马内Caspase-3基因表达无显著差异(P0.05);模型组大鼠海马Caspase-3基因表达较正常组明显增加(P0.01)；与模型组比较,模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组大鼠海马Caspase-3基因表达均明显降低(均P0.01)；氟西汀的降低作用优于针刺(P0.01)。 7血清与海马HSP70含量 大鼠血清与海马HSP70表达,正常组与正常+SP组之间无显著差异(P0.05)；模型组大鼠血清与海马内HSP70表达较正常组明显增加(均P0.01)；与模型组比较,模型+SP组、针刺组、针刺+SP组、氟西汀组、氟西汀+SP组大鼠血清与海马HSP70表达明显降低(均P0.01)；氟西汀的降低作用优于针刺(P0.01)。结论 1强迫游泳应激使大鼠出现行为绝望状态,增加游泳不动时间。针刺与氟西汀干预均能有效改善模型大鼠行为学变化。 2强迫游泳应激增加大鼠血清与海马IL-1β、IL-6、TNF-a的分泌。针刺与氟西汀干预均能有效降低模型大鼠血清与海马IL-1β、IL-6、TNF-a的过度分泌。 3强迫游泳应激激活大鼠海马JNK信号通路,提高JNK的磷酸化水平。针刺与氟西汀均能降低模型大鼠海马JNK的磷酸化水平,有效抑制模型大鼠脑内JNK信号通路活性。 4强迫游泳应激增加大鼠海马c-jun和Caspase-3基因的表达。针刺与氟西汀均能显著降低模型大鼠海马c-jun和Caspase-3基因的表达。 5强迫游泳应激增加大鼠血清与海马HSP70含量。针刺与氟西汀干预使模型大鼠血清与海马HSP70含量趋于正常水平。 6SP600125对正常生理状态下大鼠行为学、促炎性细胞因子、JNK通路主要效应因子、HSP70的表达没有影响。而对强迫游泳应激模型大鼠的行为学变化有显著改善作用。同时,明显降低模型大鼠促炎性细胞因子的分泌,抑制海马JNK的磷酸化水平,降低c-jun和Caspase-3基因的表达,下调海马内HSP70高表达。 7针刺与氟西汀对强迫游泳应激模型大鼠行为学的改善作用无显著差异。对模型大鼠血清与海马促炎性细胞因子、c-jun、 Caspase-3基因以及HSP70的调节作用二者存在差异性,氟西汀优于针刺。
【关键词】：针刺 氟西汀 强迫游泳 抑郁症 JNK信号通路 差异性
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R749.4
【目录】：

• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-13
• 英文缩略词表13-15
• 前言15-17
• 第一部分 文献综述17-50
• 综述一 现代医学对抑郁症的研究进展17-34
• 1 抑郁症概述17
• 2 应激与抑郁症17-18
• 3 海马与抑郁症18-19
• 4 细胞因子与抑郁症19-21
• 5 JNK信号转导通路与抑郁症21-22
• 6 抑郁症动物模型22-26
• 7 抑郁症的西医治疗进展26-28
• 参考文献28-34
• 综述二 抑郁症的针刺治疗研究进展34-50
• 1 针刺治疗抑郁症临床研究34-39
• 2 针刺抗抑郁机制研究39-45
• 参考文献45-50
• 第二部分 实验研究50-81
• 实验一 针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠行为学的影响50-56
• 前言50
• 材料与方法50-52
• 结果52-54
• 小结54-56
• 实验二 针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠血清、海马内细胞因子的影响56-62
• 前言56
• 材料与方法56-58
• 结果58-61
• 小结61-62
• 实验三 针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠海马JNK通路信号效应分子的影响62-71
• 前言62
• 材料与方法62-66
• 结果66-70
• 小结70-71
• 实验四 针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠海马Caspase-3基因的影响71-77
• 前言71
• 材料与方法71-75
• 结果75-76
• 小结76-77
• 实验五 针刺与氟西汀对强迫游泳应激大鼠血清与海马HSP70的影响77-81
• 前言77
• 材料与方法77-78
• 结果78-80
• 小结80-81
• 第三部分 分析讨论81-95
• 1 选题依据81-82
• 2 模型的选择与建立82
• 3 穴位的选择与干预方法82-83
• 4 阳性药物的选择83
• 5 检测指标选择的依据83-84
• 6 针刺与氟西汀对大鼠行为学的影响84-85
• 7 针刺与氟西汀对大鼠血清与海马细胞因子的影响85-86
• 8 针刺与氟西汀对大鼠海马JNK通路效应分子的影响86-87
• 9 针刺与氟西汀对大鼠海马Caspase-3基因表达的影响87-88
• 10 针刺与氟西汀对大鼠血清与海马Hsp70表达的影响88-89
• 11 针刺与氟西汀对强迫游泳应激模型大鼠JNK信号通路影响的差异性89-90
• 参考文献90-95
• 第四部分 结论95-96
• 展望95-96
• 致谢96-97
• 个人简历97-98

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 侯安继;胡艳;周维;张红卫;唐志佼;;老年抑郁大鼠海马CA3区c-fos和Caspase-3蛋白的表达[J];武汉大学学报(医学版);2008年01期

2 王哲;胡随瑜;雷德亮;宋炜熙;;慢性应激对大鼠海马神经元PKA和P-CREB蛋白表达的影响及抗抑郁剂的拮抗作用[J];中南大学学报(医学版);2006年05期

3 郑华;王默力;段冬梅;于春水;图娅;;抑郁症首次发病患者海马磁共振质子波谱成像的研究[J];神经疾病与精神卫生;2008年06期

4 杨福中;施慎逊;;强迫游泳实验研究应用及进展[J];上海精神医学;2009年03期

5 韩毳,李晓泓,李学武,郭顺根;电针“百会”、“三阴交”穴对慢性应激抑郁模型大鼠HPA轴的影响[J];北京中医药大学学报;2001年03期

6 史榕荇;秦丽娜;吴茜;王远征;图娅;;电针对慢性应激模型大鼠行为学及海马谷氨酸含量影响的研究[J];北京中医药大学学报;2007年03期

7 王远征;淑沙尼克;宋萌;图娅;;电针抗抑郁疗效作用特点分析[J];北京中医药大学学报;2010年03期

8 梁佳;卢峻;王俊仁;崔善福;阿英格;图娅;;不同针刺方法对慢性应激抑郁大鼠下丘脑CRH基因表达及血清ACTH、CORT的影响[J];北京中医药大学学报;2012年04期

9 韩传宝;周钦海;钱燕宁;;热休克蛋白70对细胞应激反应的调节[J];临床麻醉学杂志;2008年08期

10 张莉;哈木拉提·吾甫尔;;细胞因子在神经-内分泌-免疫网络中的调节机制[J];免疫学杂志;2006年S1期

，

本文编号：1077404