重组人死亡受体6胞外结构域的制备及与淀粉样前体蛋白N端片段相互作用鉴定

发布时间：2017-10-25 22:28

  本文关键词：重组人死亡受体6胞外结构域的制备及与淀粉样前体蛋白N端片段相互作用鉴定

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【摘要】：人淀粉样前体蛋白氨基端切割片段(a cleaved amino-terminal fragment of amyloid precursor protein,N-APP)结合死亡受体6(Death receptor-6,DR6),会触发神经元和轴突依赖天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的自我毁灭过程,从而导致阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)的发生。为了在分子水平上研究N-APP-DR6诱导神经元退化途径,制备大量纯化的重组DR6胞外结构域以及鉴定NAPP和DR6胞外结构域的结合位点是关键。从甲醇毕赤酵母中成功表达并纯化了重组DR6胞外域(aa42-349),得率高达90 mg/L。为了验证DR6和NAPP的相互作用关系,构建谷胱甘肽转移酶-死亡受体6(GST-DR6)(aa42-349)融合蛋白原核表达质粒,转化大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)BL21,表达融合蛋白GST-DR6(aa42-349),同时纯化得到DR6的配体NAPP,GST pull-down结果显示DR6与NAPP能够在细胞外发生相互作用。
【作者单位】： 西南大学生命科学学院;重庆市生物技术研究所有限责任公司;
【关键词】： 阿尔茨海默病 死亡受体- 淀粉样前体蛋白 毕赤酵母 GST pull down
【基金】：重庆市自然科学基金(CSTC.2011BB0146)资助项目
【分类号】：R749.16
【正文快照】： 阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是一种中枢神经系统变性病,起病隐袭,病程呈慢性进行性,是老年期痴呆最常见的一种类型。AD在世界范围内已成为继肿瘤、心血管疾病之后居第三位的致死性疾病,目前,AD的发病机制仍不清楚,因而成为研究焦点。淀粉样前体蛋白(β-amyloid pre

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