硒、锌对老年性痴呆模型的保护作用研究

发布时间：2017-10-27 14:21

  本文关键词：硒、锌对老年性痴呆模型的保护作用研究

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【摘要】：目的微量元素硒和锌在中枢神经系统中的含量是比较丰富的,并且在维持中枢神经系统正常的生理功能起到特别重要的作用。本文主要从体内实验和体外实验两个方面进行,研究硒、锌对p淀粉样蛋白(Aβ25-35)诱导胚鼠神经元细胞神经毒性的保护作用和对痴呆模型小鼠学习记忆障碍及脑组织生化指标改变的影响。方法体外实验：将胚鼠神经元细胞用l0mol/L的Aβ25-35处理,建立体外老年痴呆模型。采用了细胞形态学方法、噻唑蓝比色法(MTT)、乳酸脱氢酶(LDH)检测法、微量丙二醛(MDA)检测法、过氧化氢(H202)含量检测法、一氧化氮(NO)含量检测法、蛋白印迹方法检测糖原合成酶激酶-3β (GSK-3β)、磷酸化Tau蛋白(Ph-Tau)水平。体内实验：取60只雄性昆明小鼠,体重18-20 g,随机分组成6组,每组10只,每只小鼠按O.1ml/10g的剂量给药。用D-半乳糖连续腹腔注射50天建立小鼠痴呆模型,灌胃给予硒、锌进行保护,连续染毒45天,实验时间共50天,每天观察动物一般症状,采用避暗实验、穿梭实验、跳台实验观察小鼠学习记忆能力,通过生化检测方法检测小鼠脑组织丙二醛(MDA)、乙酰胆碱酯酶(AchE)、单胺氧化酶(MAO)变化。结果体外实验结果：Aβ25-35损伤组与对照组比较MTT代谢率下降,LDH释放量增多,MDA含量增高,H202含量增高,NO含量增高,GSK-3p、 Ph-Tau水平增高,硒、锌和硒锌联合处理组均不同程度地减少Aβ25-35的细胞毒性,硒保护作用差异显著。体内实验结果：模型组小鼠与硒、锌各给药组小鼠相比,避暗实验显示潜伏期缩短,进入暗室次数增加,穿梭实验显示潜伏期缩短,电击穿梭次数增加；跳台实验潜伏期缩短,错误率增加,脑组织内的单胺氧化酶(MAO)、乙酰胆碱酯酶(AchE)活性和丙二醛(MDA)含量都明显增高。提示硒、锌和硒锌联合处理组均不同程度地改善小鼠学习记忆障碍,降低脑组织内MAO、 AchE、 MDA含量。结论微量元素硒、锌对Aβ25-35处理胚鼠神经元细胞损伤和毒性具有一定的保护作用,可以有效的改善痴呆模型小鼠的学习记忆障碍,改变脑组织内MAO、MDA含量,因此硒、锌可能在一定程度上对老年痴呆起到了调节和保护作用。
【关键词】：硒、锌 阿尔茨海默病 学习记忆障碍 Aβ_(25-35) MAO MDA TchE GSK-3β Ph-Tua
【学位授予单位】：延边大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R749.16;R-332
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-8
• 中英文缩写词8-11
• 第一章 前言11-18
• 第二章 实验材料18-21
• 2.1 实验动物18
• 2.2 实验试剂18-20
• 2.3 实验仪器20-21
• 第三章 实验方法21-29
• 3.1 体外实验21-24
• 3.1.1 试剂配制21
• 3.1.2 细胞培养21-22
• 3.1.3 实验分组及药物保护22
• 3.1.4 噻唑蓝比色法(MTT)22
• 3.1.5 乳酸脱氢酶(LDH)含量测定22
• 3.1.6 过氧化氢、一氧化氮和丙二醛测定22
• 3.1.7 裂解细胞、测定蛋白浓度22-23
• 3.1.8 GSK-3β和P-Tau蛋白水平测定23-24
• 3.2 体内实验24-28
• 3.2.1 试剂配制24-25
• 3.2.2 小鼠模型建立与分组25
• 3.2.3 跳台实验25
• 3.2.4 避暗实验25
• 3.2.5 穿梭实验25-26
• 3.2.6 脑组织匀浆及蛋白含量测定26
• 3.2.7 小鼠脑组织丙二醛检测26-27
• 3.2.8 小鼠脑组织乙酰胆碱酯酶检测27
• 3.2.9 小鼠脑组织单胺氧化酶检测27-28
• 3.3 统计分析28-29
• 第四章 实验结果29-36
• 4.1 体外实验结果29-33
• 4.1.1 胚鼠皮层神经元细胞的观察29-30
• 4.1.2 MTT、LDH、MDA、H_2O_2、NO检测结果30
• 4.1.3 蛋白浓度测定30-31
• 4.1.4 GSK-3β和Ph-Tau蛋白水平测定结果31-33
• 4.2 体内实验结果33-36
• 4.2.1 跳台实验结果33
• 4.2.2 避暗实验结果33-34
• 4.2.3 穿梭实验结果34-35
• 4.2.4 硒、锌对小鼠脑组织MAO、TChE活性影响35
• 4.2.5 硒、锌对小鼠脑组织脂质过氧化物MDA影响35-36
• 第五章 讨论36-39
• 第六章 结论39-40
• 参考文献40-46
• 致谢46-47
• 附录A (攻读学位期间发表论文目录)47

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本文编号：1103868