复合型AD大鼠模型炎症因子、Trx与神经细胞凋亡的关系研究

发布时间：2018-03-03 01:34

  本文选题：阿尔茨海默病　切入点：硫氧还蛋白　出处：《苏州大学》2013年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的：建立一种复合型阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)动物模型。在此基础上观察复合型AD模型大鼠的学习记忆能力，，检测复合型AD模型大鼠炎症因子的表达，探讨炎症因子与AD发病机理中的相关性，以及AD模型鼠脑中硫氧还蛋白的表达与神经细胞凋亡通路的关系，为AD的的发病机制、临床防治等提供新的科学理论依据。 方法： （1）复合型AD大鼠模型的建立实验分组：对照组（A组）和模型组（B组）。采用腹腔注射D-半乳糖联合侧脑室注射Aβ1-42建立复合型AD模型组；选用正常大鼠作为对照组。 （2）行为学检测采用Morris水迷宫检测两组大鼠学习和记忆能力； （3）形态学的观察苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining，HE染色)观察神经元形态及数量的变化； （4）病理特征的观察观察Tau蛋白数量的变化； （5）酶联免疫吸附测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）检测大鼠大脑皮质、纹状体、海马、小脑以及牙周组织相关炎症因子（CRP，IL-1β，IL-6和TNF-α）的测定。 （6）免疫组织化学检测脑组织各区Trx的表达。 （7）western blotting检测细胞外调节蛋白激酶(extracellular regulated proteinkinases，ERK)和p38MAPK的检测； （8）生物信息验证AD中Trx与MAPK信号通路之间的关系。 结果： （1）Morris水迷宫检测显示：与对照组相比，模型组大鼠学习和记忆能力明显下降，有显著性差异（P0.01）； （2）HE染色结果显示：与对照组相比，模型组染色神经元的数量有相当程度的减少，差异具有统计学意义（P0.01），同时，模型组神经元可见核固缩、胞体变小等形态学改变； （3）免疫组织化学检测结果显示：与对照组相比，模型组的Tau蛋白表达明显增加； （4）ELISA检测结果显示：模型组皮质、海马、血清以及牙周组织中，相关炎症因子（CRP，IL-1β，IL-6和TNF-α）的表达显著增加，与对照组相应指标相比都具有统计学意义（P0.05或P0.01），而两组在纹状体、小脑中的炎症因子表达差异不明显或者不具有统计学意义； （5）模型组中的Trx，ERK、p38MAPK表达水平和对照组相比有差异，具有统计学意义；生物信息验证了它们之间具有调控关系。 结论： （1）较好的在衰老的基础上建立了一种AD复合动物模型，初步探讨了衰老与AD之间存在的潜在关系。 （2）在D-半乳糖亚急性衰老模型基础上可建立Aβ1-42复合式AD动物模型。这种复合式动物模型不仅能在行为学，生化指标及组织学上较好地模拟AD病理特征，用于老年痴呆的基础研究，而且也可用于探讨老年痴呆的防治途径。 （3）D-半乳糖联合Aβ1-42建立的复合型AD大鼠模型中，相关炎症因子（CRP，IL-1β，IL-6和TNF-α）明显增多，而炎症因子的增加反过来会加速AD的发病进程。因此，炎症因素的抑制可能是AD的临床治疗上需要考虑的靶点之一。 （4）D-半乳糖联合Aβ1-42建立的复合型AD大鼠模型中， Trx和ERK在脑组织各个区域的表达都有明显的下降，而p38MAPK表达上调。提示AD中Trx的下降与神经细胞凋亡的之间有重要的联系。
[Abstract]:Objective: to establish a composite type of Alzheimer's disease (Alzheimer 's disease, AD) animal model. Based on the observation of compound AD in a rat model of learning and memory ability, expression of inflammatory factor composite AD rat model, to investigate the correlation between inflammatory cytokines and the pathogenesis of AD, as well as the relationship between the AD model of rat brain in the expression of thioredoxin and apoptosis of neural pathways, for the pathogenesis of AD and provide scientific theoretical basis for new clinical prevention.
Method锛

本文编号：1559020