石斛合剂对STZ诱导的认知功能障碍大鼠脑组织保护机制研究
本文选题：石斛合剂 切入点：STZ 出处：《福建中医药大学》2017年硕士论文 论文类型：学位论文
【摘要】：目的研究石斛合剂对链脲佐菌素STZ(streptozotocin,STZ)诱导的认知功能障碍大鼠海马组织的保护作用机制,为阿尔茨海默症的防治提供新的研究思路。方法Wistar大鼠(体重220g左右,SPF级,雄性)40只,适应性喂养一周,随机分为五组,其中8只作为正常组,剩余32只行侧脑室定位注射(intracerebroventricular injection,ICV)。正常组大鼠不做任何处理,同期常规饲养;其中8只大鼠侧脑室注射10μL生理盐水替代链脲佐菌素,即为假手术组;剩余24只大鼠均侧脑室定位注射10%链脲佐菌素1OμL,32只大鼠均于第3日重复注射一次;建模一周后,采用Morris水迷宫实验进行行为学检测,根据水迷宫实验结果将24只大鼠随机分为模型组、低剂量组、高剂量组,灌胃石斛合剂4周后,再次利用Morris水迷宫对大鼠进行行为学检测,检测结束后禁食10h进行取材,麻醉大鼠后,各组随机选取4只先后利用生理盐水和4%多聚甲醛溶液作全身灌注,待肝脏及四肢变僵硬则停止灌注,断头取脑并取海马,海马组织行HE染色、刚果红染色;TUNEL法检测海马组织内神经细胞凋亡程度;各组余下大鼠取海马组织,分别采用 RT-qPCR 及 Western bolt 检测 BCl-2、Bax、Caspase-3 的 mRNA 转录及蛋白表达水平。结果1大鼠一般情况观察:正常组大鼠活动度正常,饮食、饮水量正常,假手术组大鼠活动度差,饮食、饮水量正常,模型组大鼠偶有出现茸毛现象,行动力差,体重有所减轻,经药物治疗后,情况较前有所好转。2大鼠Morris水迷宫实验:药物干预前,与正常组比,假手术组与模型组大鼠寻找水下平台的时间延长、跨越平台次数减少且统计学差异极显著(P0.01);药物干预后,与模型组相比,高剂量组大鼠到达平台的时间缩短、跨越平台次数增多但无统计学差异(P=0.067),低剂量组大鼠到达平台时间缩短、跨越平台次数增多且统计学差异极显著(P0.01);其中假手术组和模型组与正常组大鼠相比,寻找水下平台的时间延长、跨越平台次数增多且统计学差异极显著(P0.01)。3大鼠海马组织HE染色:正常组细胞数量多排列整齐,形态正常且分布均匀,胞内结构正常,染色正常;模型组细胞数量减少,可见许多细胞体积缩小,排列不规则,分布不均匀,胞核固缩,染色加深;药物干预后,与模型组相比,高剂量组和低剂量组细胞数量增多,细胞内结构、排列、形态均有所改善,染色正常。4大鼠海马组织刚果红染色:与正常组比,模型组的阳性斑块数增多且统计学差异极显著(P0.01);药物干预后,与模型组比,高剂量组和低剂量组的阳性斑块数减少且统计学差异极显著(P0.01);与高剂量组比,低剂量组的阳性斑块数减少且统计学差异显著(P0.05)。5大鼠海马组织TUNEL法凋亡检测:与正常组比,模型组的阳性染色细胞数量增多且统计学差异极显著(P0.01);药物干预后,与模型组比,低剂量组和高剂量组的阳性染色细胞数量减少且统计学差异极显著(P0.01)。6大鼠海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3mRNA的表达:与正常组比,模型组Bcl-2mRNA表达水平降低且统计学差异显著(P0.05),BaxmRNA、Caspase-3mRNA表达水平升高且统计学差异极显著(P0.01);药物干预后,与模型组比,低剂量组Bcl-2mRNA表达水平升高但无明显差异(P=0.0503),BaxmRNA、Caspase-3mRNA表达水平显著降低且统计学差异极显著(P0.01),高剂量组Caspase-3mRNA表达水平降低但无明显差异(P0.05),Bcl-2mRNA表达水平升高但无明显差异(P0.05),BaxmRNA表达水平降低且统计学差异极显著(P0.01)。7大鼠海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3的蛋白表达:与正常组相比,模型组Bcl-2蛋白表达量降低且统计学差异显著(P0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达量升高且统计学差异极显著(P0.01);药物干预后,与模型组比,高剂量组和低剂量组Bcl-2的蛋白表达量升高且统计学差异显著(P0.05),Bax蛋白表达量降低且统计学差异显著(P0.05),Caspase-3蛋白表达量降低且统计学差异极显著(P0.01)。结论1.石斛合剂可增强STZ诱导的认知功能障碍大鼠的学习记忆能力;2.石斛合剂可减少STZ诱导的认知功能障碍大鼠脑组织的斑块沉积以及减轻大鼠脑组织的凋亡坏死程度;3.石斛合剂可能通过上调Bcl-2、下调Bax、Caspase-3的表达量,抑制认知功能障碍大鼠的脑损伤。
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【学位授予单位】：福建中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R749.16
【参考文献】
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，本文编号：1565256
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