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褪黑素对母婴分离小鼠青年期HPA轴和神经发生的影响

发布时间:2018-03-05 08:57

  本文选题:褪黑素 切入点:母婴分离 出处:《山西医科大学》2017年硕士论文 论文类型:学位论文


【摘要】:第一部分母婴分离对小鼠青年期HPA轴和神经发生的影响目的:探讨新生期母婴分离(maternal separation,MS)对小鼠青年期HPA轴和神经发生的影响。方法:12只怀孕昆明小鼠随机分为母婴分离组(即MS组)和对照组。其中MS组又分为7 d、14 d、21 d三个亚组(7 d组在P1~P7期间新生鼠与母鼠每天分离3 h,依次类推);对照组新生鼠出生后与母鼠同笼喂养不做任何处理。所有仔鼠于P23断乳,雌雄分笼,雄性小鼠按照每笼5~7只原则喂养至P42处死取脑,常规石蜡包埋。用免疫组织化学染色法和Image J图像分析技术检测各组海马和前额叶皮质区糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)和微管相关蛋白(doublecortin,DCX)的表达和分布。结果:GR免疫阳性产物呈棕褐色颗粒状均匀分布于胞浆和胞核,在海马阳性细胞呈带状排列;在前额叶皮质区,GR免疫阳性细胞分布广泛。GR阳性细胞在各组小鼠海马和前额叶皮质均有不同程度的表达。与对照组相比,MS组从7 d组开始海马和前额叶皮质区内GR免疫阳性细胞表达开始减弱,密度下调,并随着分离重复时间的延长,呈显著递减趋势。MS各组小鼠平均光密度值均明显低于对照组,差异具有统计学意义(P㩳0.05);MS组间比较差异有统计学意义(P㩳0.05)。DCX阳性产物表达于细胞的胞浆和突起内,呈棕色,DCX阳性细胞胞体呈梭形,单个前导突起,大部分突起朝向并深入分子层。各组DCX阳性细胞在小鼠海马齿状回颗粒下层都有不同程度的表达,在前额叶皮质区未见表达。与对照组相比,MS组从7d组开始阳性细胞开始明显减少,并随着分离重复时间的延长,阳性细胞数呈递减趋势;MS各组平均光密度值均低于对照组,差异具有统计学意义(P㩳0.05);MS组间比较差异有统计学意义(P㩳0.05)。结论:MS使小鼠青年期海马和前额叶皮质GR表达减少、减弱,海马齿状回颗粒下层神经发生减少,且随着分离重复时间的延长,呈递减趋势。可见经历MS早期不良生活事件的小鼠青年期海马和前额叶皮质GR表达下调,HPA轴对应激的反应性增高,抑制神经发生,分离时间越长对HPA轴和神经发生影响越大。第二部分褪黑素对母婴分离小鼠青年期HPA轴和神经发生的影响目的:探讨褪黑素(Melatonin,MT)对新生期母婴分离(maternal separation,MS)小鼠青年期HPA轴和神经发生的调节作用。方法:9只怀孕昆明小鼠随机分为母婴分离+褪黑素干预组(即MS+MT组)、母婴分离+生理盐水组(即MS+NS组)和对照组。MS+MT组和MS+NS组在P1~P21期间新生鼠与母鼠每天分离3 h;MS+MT组新生鼠于P7起每日17:00连续腹腔注射MT(10ml·kg-1·d-1)14 d;MS+NS组于P7起每日17:00连续腹腔注射生理盐水(10ml·kg-1·d-1)14 d;对照组新生鼠出生后与母鼠同笼喂养不做任何处理。所有仔鼠于P23断乳,雌雄分笼,雄性小鼠按照每笼5~7只原则喂养至P42处死取脑,常规石蜡包埋。用免疫组织化学染色法和Image J图像分析技术检测各组海马和前额叶皮质区GR和DCX的表达和分布。结果:GR免疫阳性产物呈棕褐色颗粒状均匀分布于胞浆和胞核,在海马阳性细胞呈带状排列;在前额叶皮质区,GR免疫阳性细胞分布广泛。GR阳性细胞在各组小鼠海马和前额叶皮质均有不同程度的表达。MS+NS组海马和前额叶皮质区内GR免疫阳性产物主要位于胞浆且表达减弱,其平均光密度值明显低于对照组,差异具有统计学意义(P㩳0.05)。经MT干预后,海马和前额叶皮质区内GR表达增强、密度增高,与MS+NS组和对照组比较差异均具有统计学意义(P㩳0.05)。DCX阳性产物表达于细胞的胞浆和突起内,呈棕色,DCX阳性细胞胞体呈梭形,单个前导突起,大部分突起朝向并深入分子层。各组DCX阳性细胞在小鼠海马齿状回颗粒下层都有不同程度的表达,在前额叶皮质区未见表达。与对照组相比,MS+NS组海马齿状回DCX免疫阳性细胞数明显降低,其平均光密度值明显低于对照组,差异具有统计学意义(P㩳0.05)。经MT干预后,海马齿状回DCX阳性表达明显升高,与MS+NS组和对照组比较差异均具有统计学意义(P㩳0.05)。结论:MT使海马和前额叶皮质GR表达显著增加,神经发生增加。可见MT参与了机体应激反应,抑制HPA轴活性,提高了MS小鼠青年期海马神经发生水平。MT可以逆转MS早期不良生活经历对小鼠大脑发育过程中的永久性损伤。
[Abstract]:......
【学位授予单位】:山西医科大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2017
【分类号】:R749

【参考文献】

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