重组pIRES-AD7c-NTP质粒的构建表达及其对PC12细胞凋亡的影响
本文选题:阿尔茨海默病相关神经丝蛋白 + 质粒构建 ; 参考:《中风与神经疾病杂志》2015年05期
【摘要】:目的构建重组pIRES-AD7c-NTP质粒,探究其对PC12细胞凋亡的影响。方法构建pIRESAD7c-NTP重组质粒,通过脂质体体外转染至PC12细胞内,RT-PCR检测凋亡相关蛋白bcl-2和bax的mRNA表达变化含量变化。结果成功构建pIRES-AD7c-NTP重组质粒并转染至PC12细胞内;重组质粒转染组出现了明显的细胞凋亡,流式细胞仪检测出典型凋亡峰;重组质粒转染组中bcl-2表达低于对照组,bax表达高于对照组。结论 AD7c-NTP重组质粒转染组PC12细胞内bcl-2/bax表达异常,说明AD7c-NTP增加凋亡促进蛋白的表达、同时减少凋亡抑制蛋白的表达,可见AD7c-NTP可导致神经细胞发生凋亡,为后续研究提供实验基础。
[Abstract]:Objective to construct recombinant pIRES-AD7c-NTP plasmid and investigate its effect on apoptosis of PC12 cells.Methods pIRESAD7c-NTP recombinant plasmid was constructed and transfected into PC12 cells by liposome in vitro. The changes of mRNA expression of bcl-2 and bax were detected by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR).Results the recombinant plasmid of pIRES-AD7c-NTP was successfully constructed and transfected into PC12 cells, the apoptosis was observed in the transfected group, and the typical apoptotic peak was detected by flow cytometry. The expression of bcl-2 in the transfected group was lower than that in the control group, and the expression of bcl-2 in the transfected group was higher than that in the control group.Conclusion the abnormal expression of bcl-2/bax in PC12 cells transfected with AD7c-NTP recombinant plasmid indicates that AD7c-NTP can increase the expression of apoptosis-promoting protein and decrease the expression of apoptosis-inhibiting protein. It can be seen that AD7c-NTP can induce neuronal apoptosis and provide experimental basis for further study.
【作者单位】: 吉林省人民医院神经内科;
【基金】:吉林省科委课题(200705464)
【分类号】:R749.16
【共引文献】
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本文编号:1751808
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